油藏是一个特殊环境,对其中孕育的微生物及其功能的研究具有重要的理论和应用价值。分子生物学方法可作为深入认识油藏微生物的有效手段。本文采用16S rRNA基因文库方法对中国陆上三个油田6个区块样品微生物群落组成进行了分析。结果表明,油藏环境样品中存在丰富的微生物,其中古菌多数是产甲烷菌,少数为古细菌(Themococcus、Halogeometricum和Thermogymnomonas),还检测到少数未分类的新型古菌。产甲烷菌主要包括甲基营养型(Methanomethylovorans)、乙酸营养型(Methanosaeta)和氢营养型产甲烷菌(Methanothermobacter、Methanolinea、Methanoculleus等),其中氢营养型产甲烷菌丰度最大。就细菌而言,Proteobacteria出现频率最高,丰度也最大,Firmicutes、Bacteroidetes、Actinobacteria和Thermotogae也占有一定的比例。综合分析微生物组成与油藏环境的关系,认为油藏温度对微生物组成影响显著：高温油藏以高温菌为主,中低温油藏同时存在高温菌和嗜温菌；矿化度对油藏细菌类型分布也存在一定的影响,温度相近条件下,矿化度高的油藏细菌类型一般较少,矿化度低的油藏,细菌类型较丰富。针对4个采油井产出水样品,利用烷基琥珀酸合成酶基因ASSa-亚基(assA)目标片段为523 bp的功能基因引物检测了该基因的多样性,建立了assA功能基因文库,发现了新的assA基因及较远分支的类assA基因。由此认为,油藏中存在以延胡索酸加成为生物活化方式的石油烃厌氧降解菌。这些菌不属于已知含有assA基因的菌群,目前无法确定它们的分类。本研究将有助于丰富油藏环境中的菌群及油藏中进行的厌氧降解过程的认识。