基于稀土荧光生物标记探针长寿命荧光特性而发展起来的高灵敏的时间分辨荧光生化分析技术已经在临床检测与生物技术领域得到了广泛的应用。但由于大多数稀土荧光生物标记物需使用光毒性较大的紫外光作为激发光源,对活体生物样品有一定的光损伤,而目前已知的几种长波长激发铕配合物又存在水溶性差、极性配位溶剂中不稳定、发光量子产率低或缺乏活性标记基团等问题而无法用于生物标记,从而大大限制了时间分辨荧光生化分析技术在活体样品检测分析中的应用。本研究通过将两种配体4,4’-二(1”,1”,1”,2”,2”,3”,3”-七氟-4”,6”-己二酮-6"-基)氯磺酰基-邻二苯基苯(BHHCT)及2-(N,N-二乙基苯胺-4-基)-4,6-二(3,5-二甲基吡唑-1-基)-1,3,5-三嗪(DPBT)共同与铕离子配位,制备出一种具有可见光激发性能的三元铕配合物BHHCT-Eu3+-DPBT,再通过将该配合物与牛血清白蛋白结合的方法,制备出一种水溶性好且可被可见光激发的铕配合物结合蛋白。该结合蛋白的荧光激发波长可延长至可见光区(>380 nm),并具有较高的荧光量子产率(27％)和较长的荧光寿命(0.46 ms),该结合蛋白标记链霉亲和素后被成功地用于水样品中病原微生物蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia),鼠隐孢子虫(Cryptosporidium muris)以及小隐孢子虫(Cryptosporidium parvium)的免疫荧光染色及时间分辨荧光显微成像测定。所得结果表明本研究制备的水溶性可见光激发铕配合物结合蛋白可作为一种新型荧光标记物用于时间分辨荧光生物成像分析领域。