目的:目前研究已证明,核心生物钟基因Period 1（PER1）异常表达与多种恶性肿瘤的发生和发展密切相关,但具体机制还不清楚。我们前期发现PER1在口腔鳞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）组织中表达降低,并与患者TNM临床分期和生存时间显著相关。但PER1在OSCC中的具体调控机制还有待进一步探索。褪黑素分泌降低是导致包括OSCC等多种癌症发生发展的重要原因,且褪黑素在多种组织中调控PER1的表达,但褪黑素在OSCC中能否调控PER1暂不清楚。近年研究显示铁死亡参与调控OSCC的发生发展,而褪黑素在非癌症疾病中也可调控铁死亡表型,但褪黑素能否在癌症中参与调控铁死亡暂无报道。因此,本研究旨在研究生物钟基因在OSCC中的调控分子机制,探索褪黑素和PER1在OSCC中对铁死亡的调控作用,以及褪黑素对PER1的具体调控作用。方法:免疫组化检测OSCC患者癌症组织石蜡切片中铁死亡负向调控蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4（Glutathione Peroxidase 4,GPX4）表达,并分析其表达与OSCC患者临床病理特征之间的关系。随后在过表达或沉默PER1的OSCC细胞中检测铁死亡的关键蛋白GPX4、溶质载体家族7成员11（solute carrier family 7 member 11,SLC7A11）和转铁蛋白受体1（transferrin receptor,TFRC）的表达,检测细胞内还原性谷胱甘肽（glutathione,GSH）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、活性氧（reactive oxygen species,ROS）和Fe2+水平,观察细胞线粒体形态的变化。在机制研究中,CHX追踪实验检测蛋白的半衰期,CO-IP检测蛋白与蛋白的结合,Ch IP实验和双荧光素酶报告实验检测缺氧诱导因子（Hypoxia-inducible factor 1alpha,HIF-1α）对PER1启动子转录活性的调控作用。结果:在OSCC组织中PER1与铁死亡关键调控蛋白GPX4和HIF-1α表达呈负相关。我们发现在过表达PER1的OSCC细胞中,PER1依赖于HIF-1α促进细胞铁死亡,而在沉默PER1的OSCC细胞中获得相反的结果,裸鼠皮下成瘤实验证明过表达PER1抑制HIF-1α,促进细胞铁死亡,并抑制OSCC生长。机制上,PER1与HIF-1α结合促进HIF-1α蛋白降解,而HIF-1α结合PER1启动子抑制PER1转录,即PER1和HIF-1α结合形成PER1/HIF-1α负反馈环。另外,我们在体外实验发现褪黑素通过调控PER1/HIF-1α环促进OSCC细胞铁死亡,裸鼠皮下成瘤实验证明褪黑素能诱导PER1升高和HIF-1α降低,促进细胞铁死亡,抑制OSCC生长。结论:我们的研究发现提示靶向PER1/HIF-1α环可能为治疗OSCC提供新的策略,开发褪黑素靶向制剂可能是治疗OSCC的一种有效方法。