【摘 要】
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为了控制犬的病毒病,该研究为基因工程生产犬IFN-γ开辟了一条新途径,同时也为基因治疗和研究犬IFN-γ的真核表达特性奠定了基础.一,该研究采用RT-PCR法克隆得到了犬IFN-γ c
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为了控制犬的病毒病,该研究为基因工程生产犬IFN-γ开辟了一条新途径,同时也为基因治疗和研究犬IFN-γ的真核表达特性奠定了基础.一,该研究采用RT-PCR法克隆得到了犬IFN-γ cDNA.克隆的基因与所报道的CaIFN-γ氨基酸水平上同源性为99﹪,3个氨基酸发生点变异,确定为一新亚型CaIFN-γ.二,构建了pRc/CMV2/CaIFN-γ重组表达质粒.采用磷酸钙转染法转染SP2/0和MDCK,经G418筛选,得到阳性表达细胞.三,经MDCK-VSV和MDBK-VSV系统检测,重组犬干扰素活性最高达7,000U/ml.其中MDCK-VSV检测系统更为敏感.
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