目的:1探讨纳米磁流体作为肝癌基因治疗载体的可行性。2 AFP增强子能否使外来基因在AFP表达阳性细胞内特异性表达。方法:构建AFP增强子调控下的含报告基因绿色荧光蛋白,目的基因hTNFα的重组质粒pEGFP-AFP-hTNFα并通过纳米磁流体分别转染入AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2及AFP表达阴性的宫颈癌细胞Hela。转染12小时后,于荧光显微镜下动态观察绿色荧光蛋白基因的表达;转染48小时后,RT-PCR和Westernblot分析HepG2细胞中目的基因hTNFα的表达情况。取获得最佳转染效率的DNA/基因转染载体的复合物比例进行细胞转染,流式细胞计数以比较不同基因转染载体的转染效率。用MTT法检测HepG2细胞的存活,结果进行统计学处理。用流式细胞仪检测HepG2细胞的凋亡。结果:纳米磁流体能将重组质粒pEGFP-AFP-hTNFα转入HepG2细胞,并且其转染效率高于脂质体;RT-PCR及Westernblot证明转染的HepG2细胞有目的基因hTNFα的表达;MTT及流式细胞分析说明hTNFα基因发挥杀伤细胞作用。结论:1纳米磁流体能将重组质粒pEGFP-AFP-hTNFα转染HepG2细胞并获得表达,可作为肝癌基因治疗的转染载体。2 AFP增强子能使目的基因在HepG2细胞中定向而特异性的表达。