【摘 要】
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目的:探究白芍总苷(total glucosides of paeony,TGP)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及足细胞Nephrin蛋白表达的影响及其对肾脏保护作用。方法:
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目的:探究白芍总苷(total glucosides of paeony,TGP)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及足细胞Nephrin蛋白表达的影响及其对肾脏保护作用。方法:(1)将大鼠随机分为对照组和模型组,模型组腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)72h后测大鼠空腹血糖,2w后测大鼠24 h尿蛋白定量(24h urinary protein,UAER)建立DN模型,造模成功后的大鼠随机分成DN组和TGP治疗组。TGP治疗组按低、中、高三个剂量随机分组,每日分别予50、100、200mg/kg TGP灌胃至8w后;对照组和DN组予等量生理盐水灌胃。(2)实验终点观察各组大鼠体质量、血糖、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(serun creatinine,Scr)、UAER。(3)行苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE),免疫组化检测肾组织中MCP-1、TNF-α及Nephrin蛋白的分布和表达情况,RT-PCR检测肾皮质中Nephrin m RNA的表达情况。结果:(1)与对照组相比,DN组大鼠出现多饮、多食、多尿及体重下降的糖尿病(diabetic mellitus,DM)症状。TGP三个剂量治疗组大鼠均未出现明显血糖下降及体重回升。(2)TGP三个剂量治疗组BUN水平较DN组降低(P<0.01);TGP高剂量组大鼠UAER较DN组减少(P<0.01);TGP三个剂量治疗组大鼠Scr与DN组比较均无差异(P>0.05)。(3)肾组织HE染色:对照组肾小球、肾小管及间质结构完整,未见异常改变;DN组肾小球肥大,系膜增生,基底膜增厚,肾小管肿胀、管腔狭窄,间质散在炎性细胞浸润,集合管边缘炎症细胞浸润明显;TGP三个剂量治疗组病理改变较DN组有不同程度减轻。(4)RT-PCR结果显示:与对照组比较,DN组及TGP三个剂量治疗组肾组织Nephrin m RNA表达下降(P均<0.05)。与DN组比较,TGP中、高剂量组Nephrin m RNA表达升高(P<0.05);TGP低剂量组Nephrin m RNA表达无明显升高(P>0.05)。(5)免疫组化:观察肾组织见MCP-1、TNF-α在正常大鼠肾小球内少量表达;与对照组比较,DN组及TGP三个剂量治疗组肾组织中MCP-1、TNF-α蛋白表达明显增强(P均<0.01);与DN组比较,TGP三个剂量治疗组肾组织中MCP-1、TNF-α蛋白表达均降低(P均<0.05)。观察肾组织见Nephrin沿肾小球足细胞毛细血管袢均匀分布;与对照组比较,DN组及TGP三个治疗组肾组织Nephrin蛋白表达降低(P均<0.05);与DN组比较,中、高剂量组Nephrin蛋白表达增高(P均<0.05);TGP低剂量组Nephrin表达未见明显增高(P>0.05)。结论:(1)TGP对DN大鼠无明显降低血糖、减轻体重作用,但可减轻尿蛋白,有一定改善肾功能,保护肾脏作用。(2)TGP可能通过下调DN大鼠肾组织炎症因子MCP-1、TNF-α的表达,上调足细胞Nephrin蛋白表达,改善肾组织炎症,减轻足细胞损伤,从而延缓DN进展。
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