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目的：内脂素（visfatin）是在2005年被确定的脂肪因子，它在动物的进化过程中保持高度的不变。已经证实内脂素为胰岛素的类似物，它能降低血浆葡萄糖的浓度，增加细胞因子的产生以及诱导血管的生成，其发挥作用可能与脂肪因子的致炎等做用相关[1]。糖尿病（diabetes mellitus，DM）心肌病是糖尿病患者重要的并发症之一，与糖尿病患者的高心力衰竭发生率和高死亡率密切相关。内脂素的促增殖、促炎等作用可能在糖尿病心肌病的病理过程中发挥一定的作用。内脂素在心血管系统中的作用研究很多，但迄今尚无高糖对心脏细胞表达、合成内脂素影响的研究。本实验的前期部分表明内脂素的分泌同高糖存在浓度—时间依赖性，但介导高糖影响内脂素分泌的细胞通路一直不明。大量研究表明在糖尿病肾病的过程中，MAPK通路在高糖的作用下激活并活化多种核转录因子，导致目的基因的表达增加，但MAPK通路在糖尿病心肌病中的作用尚无深入的研究。本实验拟探讨不同的MAPK通路在高糖刺激内脂素分泌中的作用机制，为临床治疗糖尿病，降低糖尿病的心肌损害，提供重要的理论依据和指导。前期试验已经证明了SD大鼠心肌细胞表达内脂素，显示在一定时间范围内，高糖刺激大鼠心肌细胞内脂素的表达呈浓度-时间依赖性。将心肌细胞暴露于5.5mmol/L,10mmol/L,30mmol/L,50mmol/L培养48h，结果暴露于50mmol/L的心肌细胞内脂素表达的趋势高于细胞暴露于30mmol/L的,但没有达到统计学意义。使用30mmol/l的血糖对心肌细胞进行处理,分别于6h,12h,24h,48h进行检测,结果显示心肌内脂素的表达在24h达峰。方法：无菌试验条件下提取新生2-3天的Sprague-Dawley (SD)大鼠心肌细胞进行原代培养，48h的含血清培养,24h后撤血清培养,选取形态及生长状态良好的心肌细胞随机分为5组:（1）低糖对照组（5.5mmol/L）、（2）高糖30mmol/L组、（3）高糖30mmol/L+ERK1/2抑制剂(PD9805910μmol/L)组、（4）高糖30mmol/L+JNK抑制剂(SP60012510μmol/L)组、（5）高糖30mmol/L+p38MAPK抑制剂(SB20358010μmol/L)组。该研究分别将以下抑制剂：SP600125（JNK通路抑制剂）、SB203580（p38通路抑制剂）和PD98059（ERK1/2抑制剂）提前30min加入心肌细胞培养液中进行预处理,然后与高糖（30mmol/l）共同培养24小时。应用RT-PCR技术检测内脂素mRNA的表达水平,应用Elisa技术检测培养液中内脂素蛋白的含量。结果：高糖条件下，心肌细胞经预处理，结果显示：高糖+SB203580组和低糖浓度组对比心肌细胞内脂素mRNA和细胞培养液内脂素蛋白表达有明显的区别，但与高糖组相比较有明显的降低；高糖+SP600125组及高糖+PD98059组分别较低糖浓度组有明显的区别，但与高糖组相比较无明显差异。结论：p38MAPK是细胞在高糖诱导的心肌细胞内脂素表达的过程中一个重要的通路途径，可能在糖尿病引起心肌细胞受损中发挥着作用。