目的：白血病是全球十大高发恶性肿瘤之一,在35岁以下恶性肿瘤患者中,死亡率高居首位,其中难治复发白血病是治疗失败的主要原因之一,导致难治复发白血病的根本原因则是多药耐药性(Multi-drug Resistance, MDR)的产生。多药耐药的产生往往导致化疗疗效减低甚至化疗失败,逆转肿瘤细胞的耐药性已成为近年研究的焦点之一。目前已有研究表明地西他滨(Decitabine, DAC)可能逆转部分实体瘤及血液系统恶性疾病的耐药性,但仍处于探索阶段。本研究旨在对比观察地西他滨对慢粒急变白血病细胞系K562及其多药耐药株K562/A02增殖的影响,并进行相关机制的研究,为地西他滨在逆转耐药领域的研究提供新的思路。方法：我们用CCK-8法和ATP法(Microplate Adenosine Triphosphate Assay, ATP)检测K562和K562/A02细胞株的IC50,用qPCR法验证K562/A02的多药耐药基因MDR-1的表达水平,从而证明K562/A02为多药耐药细胞性；采用Illumina Human HT-12 BeadChip技术检测K562与耐药株K562/A02的基因表达差异,并对差异基因进行基因功能、信号通路和共表达分析,构建基因相互作用网络及信号通路相互作用网络；通过PharmMapper Server分析地西他滨可能作用靶点,结合芯片分析结果寻找差异基因中的关键基因,并检测关键基因在地西他滨处理前后的变化情况,明确地西他滨对多药耐药细胞株K562/A02增值抑制的作用机制。结果：K562/A02细胞具有多药耐药性,其对地西他滨的敏感性较K562更强。这一现象与地西他滨下调FAM64A基因表达有关,但与基因组甲基化水平和DNA甲基转移酶(DNA Methyltransferases, DNMTs)表达水平无关,可能涉及的信号通路包括细胞周期、HIF-1信号通路、FoxO信号通路和VEGF信号通路等。结论：地西他滨能够通过显著下调细胞增殖相关基因FAM64A的表达水平,抑制多药耐药细胞株K562/A02的细胞增殖(P<0.05)。目的：白血病为全球十大高发恶性肿瘤之一,我国发病率为2.1-6.9/10万,死亡率高,在35岁以下的恶性肿瘤患者中高居首位。肿瘤相关抗原表达沉默从而形成免疫逃逸,这与白血病的发生、复发密切相关。地西他滨(Decitabine, DAC)是DNA去甲基化酶抑制剂,能够增强肿瘤细胞的免疫原性,强化机体抗肿瘤免疫应答,与自身或过继性输注免疫细胞发挥协同作用。我们据此设计临床试验(NCT01690507),应用地西他滨与CAG方案化疗联合HLA半相合供者淋巴细胞输注(Donor Lymphocyte Infusion, DLI)治疗老年急性髓系白血病,缓解率达到目前治疗手段中的较高水平。本研究旨在探索基于地西他滨的化疗方案联合供者淋巴细胞输注是否能够发挥协同作用,并进一步探讨作用机制。方法：首先,探索不含地西他滨的供者淋巴细胞输注是否有效。我们在第0天给予Balb/c小鼠(7-8W,♀)腹腔接种白血病细胞WEHI-3共1×105/只,分为四组PBS组、DLI组、DAC组、DAC+DLI组,后两组第1-5天予第一周期DAC腹腔注射,DLI组和DAC+DLI组在第7天和第17天分别予以两次尾静脉输注C57×Balb/c F1(CB6F1)小鼠MHC半相合脾脏单个核细胞,模拟临床供者淋巴细胞输注,第19天开始第二周期的治疗,方法同第一周期,每隔两天观察小鼠存活情况,小鼠濒死状态下实施安乐死；其次,证实基于地西他滨的化疗方案联合DLI能够延长生存时间。我们根据用药情况分为三组,分别是PBS组、DAC+Ara-C组和DAC+Ara-C+DLI组,第0天处理方式同前,后两组均于第1-5天连续腹腔注射DAC和Ara-C, DAC+Ara-C+DLI组于第7天进行小鼠脾脏细胞输注,观察小鼠生存时间；最后,采用实时定量PCR的方法,对参与DCAG+DLI方案受试者的外周血嵌合情况进行分析。结果：DLI组与PBS组小鼠生存时间没有统计学差异;相对于PBS组,DAC能够明显延长AML小鼠生存时间(P<0.0001),联合DLI发挥协同作用,进一步延长AML小鼠生存期(P=0.01)。受试者外周血嵌合分析表明,供者淋巴细胞输注第3-4天,受试者体内检测到的供者细胞数量最多,后逐渐降低,第20天未检测到供者细胞。结论：在本研究所采用的小鼠AML模型中,与地西他滨联合阿糖胞苷化疗相比,供者脾脏单个核细胞输注联合地西他滨及阿糖胞苷化疗可显著延长AML荷瘤小鼠生存时间,其中,含地西他滨的联合化疗是MHC半相合脾脏单个核细胞输注发挥抗白血病效应所必须的。供者淋巴细胞输注增强患者自身抗白血病免疫应答可能是供者单个核细胞输注的抗白血病作用机制之一,但有待进一步的深入研究。