研究目的： 本研究旨在采用RNAi技术，利用本课题组前期构建、筛选的NF1基因特异性siRNA质粒表达载体，特异性的下调C57BL/6小鼠离体施旺细胞中NF1基因的表达，构建小鼠NF1siRNA肿瘤细胞模型，并通过结合离体施旺细胞雌激素的干预，探讨雌激素对NF1基因表达活性的调控作用，及其介导的施旺细胞生物学行为改变，以研究雌激素在NF1神经纤维瘤发病机制中的作用。从而，为神经纤维瘤的防治提供新思路。 结论： 1、雌激素对NF1siRNA肿瘤细胞模型生物学行为的影响5.1.1应用含有100 μg/ml的Geneticin的培养液培养小鼠原代施旺细胞，结合酶快速消化法和差数贴壁法，成功培养和纯化了施旺细胞。 2、利用本课题组前期构建并筛选的NF1siRNA质粒1再次成功构建NF1体外肿瘤细胞模型。本研究利用本课题组前期成熟的培养原代施旺细胞的方法及构建的NF1siRNA质粒1转染施旺细胞，再次成功地构建了NF1siRNA肿瘤细胞模型。证明本课题组前期构建此细胞模型地方法切实可行，值得借鉴和推广。 3、E<,2>能促进NF1siRNA肿瘤细胞模型的增殖，并能影响其细胞周期。 4、E对NF1siRNA肿瘤细胞模型的增殖促进作用是通过提高mTERT基因的表达，进而增加端粒酶活性促进细胞增殖这一通路，而非上调NF1基因的表达。E<,2>的这一作用可以被其受体拮抗剂Tamoxifen所抑制。此与本课题组前期临床研究结果一致。 5、NF1siRNA肿瘤细胞模型的ras-GTP明显升高，表明NF1基因表达下调后，ras的失活通路受到抑制，从而导致了细胞的增殖加快，但E<,2>和其受体拮抗剂Tamoxifen并不能影响ras-GTP的水平。