氟苯尼考在健康和鸭疫里氏杆菌感染鸭的药代动力学

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本研究建立了氟苯尼考在鸭血浆、肝脏和肾脏中的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法;在建立鸭疫里氏杆菌感染模型的基础上,研究了氟苯尼考在感染鸭体内的药代动力学,考察了氟苯尼考在鸭血浆、肝脏、肾脏中的分布,为临床用药提供理论依据。在0.5 ng/mL、2.5 ng/mL和25 ng/mL的添加水平,血浆中氟苯尼考的回收率为87.60%107.84%,变异系数为2.83%9.56%,检测限为0.125 ng/mL,定量限为0.25ng/mL;在0.5μg/kg、2.5μg/kg和25μg/kg的添加水平,肝脏中氟苯尼考的回收率为77.45%96.99%,变异系数为2.45%11.49%,检测限为0.25μg/kg,定量限为0.5μg/kg;在1μg/kg、5μg/kg和50μg/kg的添加水平,肾脏中氟苯尼考的回收率为76.86%100.73%,变异系数为2.84%10.79%,检测限为0.25μg/kg,定量限为0.5μg/kg,结果表明,所建立的检测方法灵敏,效率高,能够满足药动学研究的需要。采用微量肉汤法测定了氟苯尼考在肉汤中的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。以菌落计数法测定氟苯尼考对鸭疫里氏杆菌的杀菌试验和抗菌后效应。结果表明,氟苯尼考对鸭疫里氏杆菌在肉汤中的MIC值和MBC值分别为1μg/mL和2μg/mL。从杀菌曲线和抗菌后效应可看出,氟苯尼考对鸭疫里氏杆菌有很强的杀菌作用。鸭腿部肌内注射鸭疫里氏杆菌约109 CFU/mL,感染6 h时,感染鸭出现明显的病例症状,如精神沉郁,食欲减退,嗜睡等。感染69 h之间,心脏血液中菌量稳定在106CFU/mL左右。此模型操作简单,重复性好。将156只鸭随机分为2组,各78只,其中一组用鸭疫里氏杆菌感染,分别以20 mg/kg体重单剂量肌内注射氟苯尼考,于给药前和给药后5、10、20、30、45 min和1、2、4、8、12、24、48 h各处死6只,采集其血浆、肝脏和肾脏。采用HPLC-MS/MS测定血浆、肝脏和肾脏中氟苯尼考的浓度,药动学分析软件WinNonlin 5.2.1以非房室模型拟合处理浓度-时间数据,计算相关的药动学参数。氟苯尼考在健康鸭血浆中的主要药代动力学参数为:t1/2β=4.357 h,Tmax=0.5 h,Cmax=10.231μg/mL,AUClast=25.622μg/mL·h,Vd/F=4.905 L/kg,CLB/F=0.781 L/h/kg。氟苯尼考在健康鸭肝脏中的主要药代动力学参数为:t1/2β=6.328 h,Tmax=0.5 h,Cmax=5.973μg/g,AUClast=13.462μg/mL·h。氟苯尼考在健康鸭肾脏中的主要药代动力学参数为:t1/2β=5.295 h,Tmax=0.5 h,Cmax=4.296μg/g,AUClast=9.419μg/mL·h。氟苯尼考在感染鸭血浆中的主要药代动力学参数为:t1/2β=4.399 h,Tmax=0.5 h,Cmax=9.986μg/mL,AUClast=22.792μg/mL·h,Vd/F=5.568 L/kg,CLB/F=0.877 L/h/kg。氟苯尼考在感染鸭肝脏中的主要药代动力学参数为:t1/2β=8.430 h,Tmax=0.5 h,Cmax=5.973μg/g,AUClast=4.390μg/mL·h。氟苯尼考在感染鸭肾脏中的主要药代动力学参数为:t1/2β=6.988 h,Tmax=0.75h,Cmax=2.519μg/g,AUClast=8.620μg/mL·h。氟苯尼考以20 mg/kg体重肌内注射在健康和鸭疫里氏杆菌感染鸭体内具有吸收迅速,峰浓度高,体内分布广泛,血浆消除较快的特点。感染鸭疫里氏杆菌能使鸭肝脏、肾脏中药时曲线下面积分别从13.461μg/mL·h降低到4.390μg/mL·h、9.419μg/mL·h降低到8.620μg/mL·h;峰浓度分别从5.973μg/g降低到1.991μg/g、4.296μg/g降低到2.519μg/g;消除半衰期分别从6.391 h延长到8.430 h、5.295 h延长到6.988 h。
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