【摘 要】
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目的:探讨内质网蛋白27(Endoplasmic Reticulum protein27,ERp27)在小鼠卵母细胞和人精子中的定位及与受精的关系。 方法:采用孕马血清促性腺激素(Pregnant Mare Serum Gonado
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目的:探讨内质网蛋白27(Endoplasmic Reticulum protein27,ERp27)在小鼠卵母细胞和人精子中的定位及与受精的关系。 方法:采用孕马血清促性腺激素(Pregnant Mare Serum Gonadotropin,PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Gonadotropin,HCG)对雌性小鼠行超促排卵,收集小鼠MI期、MII期的卵母细胞,应用间接免疫荧光技术检测ERp27在不同时期卵母细胞中的定位。收集小鼠MII期卵母细胞后,分空白对照组、正常血清IgG组及抗ERp27抗体封闭组,采用穿卵实验检测各组受精情况,检测ERp27对受精的影响;统计受精率和受精指数作为评估指标,用SPSS17.0分析统计数据,卡方检验分析三组受精率间的差异,单因素方差分析法分析受精指数间的差异,P<0.05时认为差异有统计学意义。另外,用上游法处理精子质量正常的男性精液后,采用间接免疫荧光技术检测ERp27在人精子的定位。 结果:间接免疫荧光的结果显示ERp27在小鼠MI期卵母细胞主要分布在胞浆的周边区域中,MII期卵母细胞则均匀分布于卵母细胞胞质;穿卵实验的结果显示,空白对照组、正常血清IgG组及抗ERp27抗体封闭组比较,受精率(90.91%vs.89.13%vs.76.00%)无显著差异(P>0.05);抗ERp27抗体封闭组的受精指数为3.20±0.92,显著低于前两组(空白对照组为5.20±1.32,正常IgG对照组为5.40±1.07),受精指数间的差异有统计学差异(P<0.05)。另外,人精子间接免疫荧光的结果显示,ERp27主要分布在精子颈部及尾部主段。 结论:ERp27在小鼠MI期及MII期卵母细胞及人精子中均有表达,且可能与精卵融合相关。
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