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目的观察1特殊角膜营养不良(corneal dystrophy,CD)家系及1原发性开角型青光眼(primary open-angle glaucoma,POAG)家系的临床表现,同时分析和探讨两家系的基因突变。方法1.收集1 CD家系3代共13人。通过眼科常规检查观察其临床表现并绘制家系遗传图谱及分析临床表现特点。在经患者及家系正常成员的知情同意后,对CD家系6个DNA样本(其中4个为患者样本),采用全基因组平均间隔约10c M左右(Marshfield遗传图谱)总共366个STR位点进行连锁分析及单倍型推断,确定该家系可能致病基因所在的区域。再选择家系2名CD患者进行全基因外显子测序后,获得定位于连锁分析确定的区域内的候选基因。将候选基因在家系及200正常人群中进行Sanger测序验证。ANNOVAR及GERP软件被用来预测分析蛋白功能。2.收集1 POAG家系5代共23人。通过眼科常规检查观察其临床表现并绘制家系遗传图谱及分析临床表现特点。在经患者及家系正常成员的知情同意后,选择POAG家系的2名患者和1名正常成员的外周血DNA进行全基因组外显子测序。分析测序数据及筛选变异后获得候选变异。选择位于POAG常见致病基因连锁定位区域内的候选变异,通过对家系其他成员及200正常人群进行基因靶向Sanger测序验证。并采用SIFT与Poly Phen软件预测蛋白功能。结果1.在CD家系中共6名成员被诊断为CD,平均发病年龄为16.5岁。该家系的临床特征为:开始以角膜缘内皮及后弹力层处出现点状、散在分布的乳白色混浊,并沿着角膜缘发展至贯通的同时,向角膜内皮中央发展。混浊为双侧、对称性表现。约40岁左右出现深基质层混浊,并随着年龄的增长,混浊发展至前基质层。我们首次报道了以角膜缘内皮层及后弹力层开始病变,并逐渐向角膜中央及浅基质层发展为特征的CD。在6名患者的基因序列检测中均发现KIAA1522基因杂合子突变(c.1331G>A)。而家系非患者及200名对照者中均未发现该基因突变。ANNOVAR及GERP软件均提示该突变影响蛋白功能。2.在POAG家系中,6名有严重临床表现和高眼压病史的成员被诊断为POAG,平均发病年龄为26.3岁,其中67%的病人需要滤过性手术治疗。其他成员无临床表现。在6名患者和3名无症状成员中,通过基因测序发现了myocilin蛋白基因(MYOC)中的3号外显子的c.C1456T突变。另外,在6名患者和3名无症状成员中,我们也发现了一从未报道过的新的基因突变:β-1,4-半乳糖基转移酶3基因(B4GALT3)中的c.G322A突变。在对照组及其他家庭成员中未发现这两种突变。SIFT,Poly Phen功能预测软件均提示两突变影响蛋白功能。结论1.我们首次报道了以角膜缘内皮层及后弹力层开始病变,并逐渐向角膜中央及浅基质层发展为特征的CD。KIAA1522基因(c.1331G>A)杂合子突变可能与该家系CD的发生及该病特殊的病变特征相关。2.MYOC基因的c.1456C<T(p.L486F)突变和B4GALT3基因的c.322G<A(p.V108I)突变可能与该POAG家系的发病相关。