论文部分内容阅读
【研究背景与目的】慢性应激可损伤海马神经元。硫化氢(Hydrogen sulfide, H2S)是一种神经保护作用的新型气体信号分子。我们以往的工作发现H2S可拮抗慢性应激诱导的大鼠海马损伤，但其机制尚未阐明。内质网(endoplasmic reticulum, ER)应激在神经损伤中具有重要地位。沉默信息因子1(Silence informationregulator-1, SIRT1)是一种组蛋白脱乙酰酶，具有神经保护作用。据此，我们推测H2S可通过上调SIRT1的表达拮抗慢性应激诱导的海马ER应激而实现其抗慢性应激诱导海马损伤的作用。本研究拟建立慢性非预期温和性应激(Chronic Unpredictable MildStress, CUMS)模型，探讨H2S对慢性应激致海马ER应激的拮抗作用并研究SIRT1对H2S这一作用的介导效应。【方法】采用大鼠脑立体定位仪对Wistar大鼠行右侧侧脑室埋管，以微量注射器对大鼠侧脑室注射SIRT1抑制剂Sirtinol (10nmol/只，icv,2w)，腹腔注射NaHS (30,100μmol/kg, ip,2w)，Western blotting检测SIRT1, C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein, CHOP)，Cleaved caspase-12和糖调节蛋白78(Glucose regulated protein78, GRP78)蛋白的表达。【结果】1. H2S减轻CUMS大鼠海马ER应激NaHS治疗组[CUMS4w，在CUMS后2w给以30或100μmol/kg(ip)治疗]大鼠海马ER应激标志蛋白GRP78, CHOP and Cleavedcaspase-12表达量显著低于CUMS (4w)组，表明H2S可抑制CUMS诱导的大鼠海马ER应激。2. H2S上调CUMS大鼠海马SIRT1的表达CUMS (4w)可明显降低大鼠海马SIRT1的表达水平；而NaHS (30或100μmol/kg, ip,2w)可逆转CUMS对大鼠海马SIRT1表达的抑制作用，提示H2S可上调CUMS大鼠海马SIRT1的表达。3.抑制SIRT1可逆转H2S对CUMS诱导海马ER应激的拮抗作用与NaHS治疗组[CUMS4w, CUMS2w后给以NaHS (30μmol/kg, ip)处理2w]比较，sirtinol处理组[CUMS4w, CUMS后2w, sirtinol (10nmol/只, icv)合用NaHS (30μmol/kg, ip)处理2w]海马组织ER应激相关标志蛋白(GRP78, CHOP and Cleaved caspase-12)表达水平显著增加，表明SIRT1抑制剂(sirtinol)可逆转H2S对CUMS所致海马ER应激的拮抗作用。【结论】1. H2S可通过改善ER应激拮抗CUMS所致海马神经损伤。2. SIRT1介导H2S的抗CUMS所致海马ER应激作用。