石斛(DendrobiumnobileLindl)是当前国际花卉市场上最重要的花卉之一。金钗石斛(Dendrobiumnobile)为春化型植物，即必须要有一定的低温处理才可以开花。本文采用蛋白质组学技术研究了低温处理后，常温条件下的金钗石斛花芽发育过程中蛋白质差异表达的变化情况。　　1.选取金钗石斛成熟苗置于人工气候室中低温处理，温度设置为：16±1℃/10±1℃，12h/12h(白天/晚上)，自然光照。低温处理一个月后，将金钗石斛放到大棚内(20-25℃)继续培养，在花芽长度为0.5cm，1cm，2cm时分别取材，样品液氮速冻后放入-80℃冰箱保存以备提取蛋白。　　2.建立了金钗石斛花芽蛋白双向电泳体系：对样品制备，IPG胶条的pH值范围等进行了优化：采用酚抽提法提取蛋白；样品与水化液1:40复溶；被动水化，上样量为1.35mg，等点聚焦程序C，选用24cmpH值3-10NL胶条和12％的凝胶分离蛋白；采用考马斯亮蓝G-250染色，获得了可识别1300个蛋白质斑点的双向电泳图谱，且重复性好、分辨率高。　　3.研究了低温处理后，存常温下金钗石斛花芽发育过程中蛋白质差异表达的变化情况。结果表明：低温处理后在常温下发现73个差异表达的蛋白质点，其中上调表达的21个，下调表达的34个，波动表达的16个，具有质的变化蛋白点有2个。对67个差异显著蛋白质斑点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱串联质谱分析，共获得51个较好的二级质谱图，通过数据库搜索，其中有47个蛋白质功能得到了鉴定。这些蛋白质主要与物质和能量代谢，应激响应，蛋白质降解，花粉特异性，细胞内外信息传递等生物学功能相关，以满足植物生长发育所需。