论文部分内容阅读
高特异性、敏感性及稳定性的外周血诊断指标对于胃癌的诊断、病情进展和预后起着非常重要的作用。大量研究表明循环中的miRNA可作为许多肿瘤疾病的诊断指标，其中包括胃癌。本研究目的是对胃腺癌患者血清miRNA的表达水平进行检测，探讨血清miRNA作为胃腺癌筛查分子标志物的意义。 实验方法： 本研究为病例对照研究，分为以下两个部分：第一部分，为本研究的初级筛选阶段，采用全新miRNA芯片（共包含2579个miRNA）对32个血清样本，其中胃腺癌（GC）16例，正常对照（NC）16例进行miRNA表达检测。分析结果初步筛选出5个miRNA进行下一部分的验证。第二部分为研究的验证阶段，采用qPCR方法对93个样本包括39例GC、12例慢性萎缩性胃炎(CAG)、12例胃黏膜轻中度不典型增生(DYS)和30例NC的5个miRNA表达量进行验证比对，进一步筛选出稳定性较高的miRNA。 实验结果： 1.通过全新基因组miRNA芯片检测，5个miRNA（let-7f-5p，miR-6770-5p，miR-744-5p，miR-6503-5p，miR-152-3p）被筛选出来进行下一步qPCR的验证。与NC相比，GC患者血清中miR-152-3p表达水平明显降低，而miR-6770-5p，miR-744-5p，miR-6503-5p和 let-7f-5p表达水平明显升高。 2.验证阶段对5个miRNA进行验证，其中miR-6503-5p在GC和NC对比中与芯片结果一致均表现为上调（P<0.01），而miR-6770-5p相比于NC出现下调（P<0.05）；其余三个miRNA（let-7f-5p，miR-744-5p，miR152-3p）在GC与NC中对比中无统计学意义，CAG和DYS相比于NC和GC，其miRNA的表达均出现下调且差异均有统计学意义（P<0.01）。 3.miR-6503-5p在qPCR验证阶段与芯片筛选阶段表达水平均上调，稳定性较高，可绘制诊断GC的ROC曲线，曲线下面积为0.680（95％CI，0.553,0.808；敏感性=0.513，特异性=0.90）,具有较高稳定性，外周血清miR-6503-5p对GC可能具有较高的诊断价值。 结论： 本研究发现miR-6503-5p对GC可能具有较高的诊断价值；let-7f-5p，miR-744-5p，miR-152-3p，miR-6770-5p和miR-6503-5p有可能作为癌前疾病及GC筛查的分子诊断标志物，但实验结果不一致，仍有待扩大临床样本量进行深入的研究。