氧化苦参碱对神经病理性疼痛的镇痛作用及其对GABA能系统的影响

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目的观察氧化苦参碱(Oxymatrine, OMT)对神经病理性疼痛的镇痛作用并初步探讨其镇痛作用机制。方法1行为药理学方法①采用机械刺痛法、热板法和冷板法分别测定坐骨神经慢性缩窄性损伤小鼠的机械缩足反射阈值、热缩足反射潜伏期和冷缩足反射次数,观察OMT对神经病理性疼痛的影响;②采用γ-氨基丁酸(Gamma Aminobutyric acid, GABA)、GABA合成酶抑制剂L-烯丙基甘氨酸(L-allylglycine, L-AG)、GABA合成和释放抑制剂3-巯基丙酸(3-Mercaptopropionic acid,3-MP)、GAT-1特异性抑制剂NO-711、GABAA受体的激动剂蝇蕈醇(Muscimol, MUS)和特异性拮抗剂荷包牡丹碱(Bicuculine, BIC)等工具药,研究其对OMT镇痛作用的影响并分析其镇痛作用机制。2免疫荧光标记技术测定OMT对小鼠脊髓背角GABAA2和GAT-1免疫阳性细胞的影响,分析OMT镇痛作用与脊髓GABAA2和GAT-1的关系。3Western blot方法检测OMT对小鼠脊髓GABAA2和GAT-1蛋白含量的影响,分析脊髓GABAA2和GAT-1对OMT镇痛作用的影响。结果1. OMT对神经病理性疼痛的影响与模型组比较,腹腔注射OMT160、80mg/kg可提高小鼠机械缩足反射阈值(P<0.05);腹腔注射OMT160、80mg/kg可延长小鼠热缩足反射潜伏期(P<0.05);腹腔注射OMT160、80和40mg/kg均可降低小鼠冷缩足反射次数(P<0.05)。2. GABA等相关工具药对OMT镇痛作用的影响与OMT(35mg/kg)+NS组比较,鞘内注射GABA(2mg/kg)、MUS(0.1μg/只)、NO-711(0.125mg/kg)均可显著提高阈下剂量OMT的机械缩足反射阈值(P<0.01);与OMT(160mg/kg)+NS组比较,腹腔注射3-MP(12.18mg/kg)、鞘内注射L-AG(5mg/kg)和BIC(0.75μg/只)能拮抗OMT(160mg/kg)的镇痛作用(P<0.01)。3. OMT对小鼠脊髓GABAA2和GAT-1免疫阳性细胞及蛋白含量的影响与模型组比较,腹腔注射OMT160mg/kg可明显增多CCI小鼠脊髓GABAA2免疫阳性细胞数和蛋白含量的表达(P<0.01);腹腔注射OMT160mg/kg可抑制CCI小鼠脊髓GAT-1免疫阳性细胞数和蛋白含量的表达(P<0.01)。结论OMT对神经病理性疼痛具有明显的镇痛作用,其镇痛机制可能与OMT上调脊髓GABAA受体和下调GAT-1的表达有关。
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