啤酒废酵母中活性物质分离纯化的初步研究

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采用超声波进行样品预处理,以不同的乙醇浓度、温度、料液比和时间对啤酒废酵母中活性成分的提取进行单因素和正交实验,考察对海藻糖提取率和蛋白质含量影响。结果表明:140 W超声预处理60 min后,用50%乙醇、料液比1:30,70℃条件下冷凝回流和搅拌加热60 min。此时海藻糖提取率较高,可达94%,蛋白质含量为5.283 mg/g。   研究了中空纤维膜(微滤和超滤)分离酵母提取液中活性成分的工艺。在膜通量试验基础上,选择料液浓度、pH和操作压力为自变量,海藻糖透过率和蛋白质截留率为响应值,采用Box-Benhnken设计的方法,SAS软件拟合得到二次多项式回归方程的预测模型,并确定超滤膜分离工艺的最佳条件为压力18 psi,温度24℃、pH6.0和料液浓度3.0%。在此条件下,膜通量为20.62 L/㎡·h,海藻糖透过率为96.82%,蛋白质截留率为95.04%。   采用超声-酶-碱法从啤酒废酵母中提取β-1,3-葡聚糖,在探讨超声波预处理和酶解最佳条件的同时,利用响应曲面法研究了NaOH浓度、温度、用量和时间对β-1,3-葡聚糖得率、纯度和蛋白质含量的影响。研究表明:酵母残渣中添加208 U/g底物的木瓜蛋白酶,在50℃、pH6.0条件下酶解8h,蛋白质去除率可达到62.82%,且回收到0.348g/L多肽、氨基酸含量丰富的蛋白水解液;当加入2.05%的NaOH30.50mL,74℃处理5.7 h,β-1,3-葡聚糖的得率为10.21%,纯度为88.14%,蛋白质含量为1.19%。超声-酶-碱法处理工艺具有β-1,3-葡聚糖得率、纯度高,蛋白质含量低及提取时间短的特点。
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