绿竹和雷竹SOC1同源基因克隆和功能分析

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SOC1(SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO1)/AGL20(AGAMOS-LIKE20)是MADS-box家族一员,在植物开花过程中起着重要的调控作用,它能够整合来自光周期途径、春化途径、自主开花途径和赤霉素途径中的信号,并与其它基因相互作用共同调节植物的开花时间以及花的类型和花分生组织。竹类植物开花时间具有不确定性,营养周期长,因此SOC1的克隆对竹类植物的成花机理研究具有重要意义。本课题根据水稻、小麦、玉米、高粱以及雷竹反转录组数据库设计引物,采用RACE方法分别得到BoSOC1cDNA全长1049bp和PvSOC1cDNA全长1025bp。高保真酶扩增绿竹SOC1ORF区得到BoSOC15种片段,分别命名为BoSOC11-3, BoSOC11-5, BoSOC1Q-2, BoSOC1Q-8, BoSOC12-5。其中BoSOC11-3开放阅读框为666bp,编码221个氨基酸;BoSOC11-5开放阅读框为669bp,编码222个氨基酸;BoSOC1Q-2开放阅读框为672bp,编码223个氨基酸;BoSOC1Q-8开放阅读框为669bp,编码222个氨基酸;BoSOC12-5开放阅读框为675bp,编码224个氨基酸。高保真酶扩增雷竹SOC1ORF区,得到1条PvSOC1序列,PvSOC1开放阅读框为681bp,编码226个氨基酸。通过序列比对发现BoSOC1和PvSOC1基因在植物中相当保守,并且与禾本科植物可聚为一类。Real-Time PCR结果表明BoSOC1在花芽中的表达量是营养芽中的12倍,而PvSOC1在开花雷竹地上部位中成熟叶中的表达量最高,在叶芽中的表达量最低;PvSOC1在不开花雷竹地上部位中叶芽中的表达量最高,在茎中的表达量最低。PvSOC1转拟南芥功能验证发现35S::PvSOC1拟南芥莲座叶数量明显少于野生型拟南芥,并且该转基因株比野生株早开花6-7天,具有明显的早花表型。转基因株还表现出花型较小,一片花瓣在开花早期被花萼包裹,不能顺利展开,表现出3片花瓣外翻表型;成熟叶片宽且短,色泽较差。转基因实验表明PvSOC1不仅在拟南芥开花过程中起促进作用,并且可能参与了拟南芥其它生理活动的基因调控。
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