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大肠杆菌β—半乳糖苷酶(beta-galactosidase)由源自大肠杆菌(Escherichia coli)LacZ基因编码。在生物工程领域，β—半乳糖苷酶被广泛使用作为基因遗传转化的报告基因，检测和筛选转基因受体。 在本研究中，以大肠杆菌LacZ基因作为模板，采用DNA shuffling的体外定向进化策略，经过三轮DNA改组，结合高效的筛选方法，获得活性提高的突变体。与野生型的大肠杆菌β—半乳糖苷酶相比，定向进化的β—半乳糖苷酶基因有13个核苷酸碱基发生变化，结果导致9个氨基酸的改变。以ONPG为底物的酶活测定结果显示，定向进化的β—半乳糖苷酶的活性相比于野生型，酶比活提高3倍。 DREBlA基因是拟南芥中的一个转录因子，它能与拟南芥中特异性的顺式作用元件(DRE)上的9bp的保守序列(TACCGACAT)结合并相互作用，从而调控干旱反应中基因的表达。 在本研究中，DREBlA基因的克隆是以抽提拟南芥的总RNA，反转录合成cDNA第一条链为模板，设计并合成一对PCR引物DreBlAZl和DreBlAZl，进行PCR扩增。扩增产物TA克隆后进行序列测定，DNA序列分析结果显示，克隆的DREBlA基因序列与Genbank登陆的序列一致。在此基础上，构建成DreBlA的植物双元载体pDreBlA，电击入根癌农杆菌LBA4404。 农杆菌介导苹果遗传转化是建立在优化八棱海棠叶片再生体系和八棱海棠农杆菌介导的高效遗传转化体系的基础上，优化的苹果再生培养基(MS+BA 4 mg／L+NAA 0.1 mg／L)获得100％的再生率。为了提高苹果的产量和打破栽培区域的限制，以抗胁迫的DREBlA基因为目的基因，利用农杆菌叶盘法转化受体材料八棱海棠，已初步获得抗性愈伤和抗性苗。