低声压级次声对局灶性脑梗死大鼠认知、运动功能和内源性神经干细胞增殖的影响

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目的:  认知、运动、语言和吞咽等功能障碍常见于脑卒中的患者,极大地损害了患者的生活自理能力,降低患者的生存质量,是患者个人、家庭和社会不可忽视的问题。根据国内外的研究及本团队的前期研究基础,低声压次声可改善脑缺血大鼠的功能状态。低声压次声通过机械共振作用可疏通微小血管,减轻脑组织梗死程度,促进神经元间的联系,体外可以促进干细胞的增殖,并且由于其穿透性强的特性,即使存在颅骨的阻隔包裹,依然可以穿透颅骨将机械共振作用传达到颅内组织。因此,本实验旨在通过建立局灶性脑缺血大鼠模型的实验,观察低声压级次声治疗后局灶性脑梗死大鼠的认知、运动功能变化情况,并通过Brdu标记及免疫荧光观察其脑组织中NSCs增殖的标记物5-溴脱氧尿嘧啶核苷酸(Brdu)和巢蛋白(Nestin)的表达程度,探讨低声压级次声对神经系统的保护机制,为脑缺血疾病提供新的治疗手段。  方法:  制备右侧大脑中动脉脑缺血再灌注(MCAO)大鼠模型,以Infrasound8TM次声治疗仪作为处理因素。将36只SD大鼠随机分为3组,分别是假手术组(n=12)、手术组(n=12)、次声组(n=12),其中假手术不进行栓塞。造模成功12小时后,次声组开始每天次声治疗1小时,其余两组置于作用探头下,但无能量输出。观察干预后第3、7和14天时各组的改良神经功能缺损评分情况,在造模后第3-6天进行Morris水迷宫训练,记录各组大鼠的逃逸潜伏时间及最后1天各组大鼠跨越平台次数。各组大鼠分别在三个时间点处死前32小时进行腹腔注射Brdu,每次间隔4小时,共3次。末次注射24小时后进行灌注取脑,切片做免疫荧光双标染色,检测脑组织中5-溴脱氧尿嘧啶核苷酸(Brdu)阳性细胞数及巢蛋白(Nestin)阳性累积光密度IOD值。  结果:  与手术组相比,次声组在三个时间点的认知功能及运动功能情况均明显改善(P<0.05)。第3、7、14天神经干细胞表达情况分别为次声组>手术组>假手术组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。随着治疗天数的增加,次声组神经干细胞增殖量呈递增趋势,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。而手术组第7天的神经干细胞增殖较第3天增加,比较差异有统计学意义(P<0.05)。第14天与第7天比较差异无统计学意义(P>0.05)。  结论:  低声压级次声治疗可促进梗死灶脑组织的神经干细胞增殖,延长其增殖时长,改善大鼠的认知、运动功能,发挥神经保护和修复作用。
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