抵抗素(resistin)是机体内非常重要的一类脂肪细胞因子,可作用于脂肪,肝脏,骨骼肌,并与胰岛素抵抗,炎症反应密切相关,影响糖脂代谢,并参与机体的能量调节。线粒体是机体内进行三羧酸循环及脂肪氧化磷酸化的重要场所,与能量代谢密切相关。近些年的研究表明,线粒体功能在肥胖,糖尿病以及胰岛素抵抗的个体中均受到损伤,甚至有线粒体数量减少的现象出现。已有研究表明resistin可以显著下调线粒体的数量,并且呈现浓度依赖性,并且影响脂肪酸氧化,促进脂肪积累。但是resistin的受体以及下调线粒体数量的具体途径并不清楚。本研究采用RT-PCR, Western Blot,双荧光报告系统和细胞转染等实验技术,研究resistin作用的受体及下调线粒体数量的信号通路。结果如下：1.在HepG2细胞中,用TLR4抗体封闭TLR4后,resistin仍可以下调线粒体数量,而用Decorin的活性抑制剂处理细胞,resistin也仍然可以下调线粒体,而基因芯片结果表明ROR1在resistin处理的hepG2细胞中不表达,表明resistin在hepG2细胞中下调线粒体的作用不是通过这三个受体。2. Resistin刺激hepG2细胞后,cAMP水平得到显著上升,而cGMP水平没有明显变化。通过先关抑制剂实验表明resistin通过激活蛋白激酶C(PKC),从而激活蛋白激酶G(PKG),且不依赖于cGMP信号途径。3.通过基因芯片技术及RT-PCR实验,证明resistin通过NF-κB信号途径发挥作用。超表达p65可以下调线粒体的数量,而用RNAi技术干扰p65则可以挽救线粒体数量被resistin下调的现象。此外,通过构建p65点突变载体和抑制剂实验表明,p65可以被PKG磷酸化激活,其磷酸化位点可能是p65的Thr464位点。4.在HEK293细胞中超表达p65,则发现pgc1α的表达量下降；而用RNAi技术干扰p65,则发现pgc1α的表达量上升；并且超表达PGC1α可以上调HEK293细胞中线粒体的含量。通过PLA实验证明p65和PGC1α是相互结合的,并且resistin促进其结合,而PKG的抑制剂KT5823则抑制两者结合。研究还发现resistin抑制PGC1α启动子活性,并且呈现浓度依赖性,而p65则通过与PGC1α结合而抑制PGC1α的自激活,从而抑制启动子的活性。5.运用RNAi技术,RT-PCR等实验探索resistin作用于PKC上游的信号通路。实验表明核转录因子p62被敲减后,可以阻碍resistin下调线粒体数量。此外,resistin下调线粒体可能是通过TNFR1发挥作用。