目的：结合柔肝中药体外时序性长时间干预软骨细胞，连续观察软骨细胞的分化过程，研究药物干预过程中软骨细胞相关因子表达水平的变化规律，探索在OA中软骨细胞在正常培养乃至向去分化方向发展过程中中药的干预特点。　　 方法：采用酶消化法体外培养兔膝关节软骨细胞并以特异性Ⅱ型胶原免疫组化染色进行细胞鉴定。采用不同浓度的HBP-A体外干预细胞培养体系，在第1、3、5、7、9天以MTT法观察细胞增殖能力并用ELISA法检测细胞上清ColⅡ、GAG的分泌。采用药物时序性长时间体外干预细胞培养体系，观察软骨细胞的形态学变化，分别以RT-PCR、ELISA、ICW法检测Aggrecan、ColⅡ、ADAMTS-5、MMP-3、SOX-9因子的表达情况。　　 结果：特异性Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定证实培养的细胞为软骨细胞。不同时间点上HBP-A在0.3mg/ml浓度表现出对软骨细胞增殖最佳的促进作用，且细胞上清中分泌的ColⅡ、GAG含量最高。经多次传代后，软骨细胞形态向成纤维细胞形态发展，退变因子Aggrecan、ColⅡ的表达含量随着传代次数的增加而减少，炎症因子ADAMTS-5、MMP-3及表型因子SOX-9的表达含量随着传代次数的增加而增加，HBP-A能一定程度促进软骨细胞分泌Aggrecan、ColⅡ，同时抑制软骨细胞分泌ADAMTS-5、MMP-3、SOX-9。　　 结论：柔肝中药能一定程度上抑制软骨细胞去分化为成纤维细胞，减缓生物学功能衰退，为柔肝中药治疗中晚期骨关节炎提供了细胞学依据。