白黄链霉菌TD-1抑制番茄灰霉病菌作用机理的初步研究

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链霉菌TD-1是本实验室筛选的具有广谱抑菌活性的生防菌株。本文初步研究了TD-1的代谢规律、对灰霉病菌的体外抑菌活性、抑菌机理、对番茄灰霉病的实体防效及对植株体内抗病相关酶活性的影响,主要研究结果如下:平板对峙结果表明,TD-1对灰霉病菌的抑制率为87.17%。利用菌丝生长速率法测定发酵原液对菌丝径向生长的抑制率达到98.1%;利用牛津杯法测定时,15X浓缩液的抑菌圈平均直径为17.75 mm。此外,TD-1发酵原液对灰霉菌菌丝干重和孢子萌发的抑制率分别为83.12%和98.3%。说明该菌株可产生对灰霉病菌有抑制作用的活性物质。TD-1发酵培养基的筛选结果表明,高氏一号培养基发酵液的抑菌活性较强,10X浓缩液的抑菌圈平均直径为1.47 cm。发酵规律初步研究发现,菌丝湿重在发酵第7 d达到最大;pH从中性变为偏碱性,最终稳定在8左右。利用光学显微镜和电子显微镜分别观察经TD-1发酵液处理后的灰霉菌菌丝结构异常。荧光显微镜观察发现,TD-1发酵液能破坏菌丝和孢子细胞膜的结构。电导率测定结果表明,TD-1发酵液增大了菌丝细胞膜渗透性,导致电解质渗漏。此外,TD-1发酵液还可以通过抑制菌体细胞膜中麦角甾醇的生成影响膜结构。实体实验证明,TD-1发酵液对灰霉病菌侵染番茄果实和离体叶片具有良好的防治效果,其防效分别为58.16%和63.49%。盆栽实验结果表明,TD-1发酵液对番茄植株的的防治效果达到76.98%。喷施TD-1发酵液和病原菌菌悬液后,番茄叶片内的抗病相关酶PAL、POD、PPO、SOD和CAT的活性在一定时间内均有明显上升。发酵液用作保护剂时:PAL、POD、PPO、SOD和CAT活性分别在接菌后第4 d、第2d、第3d、第3d和第2d达到峰值,比同时期清水对照高2.21倍、2.61倍、2.71倍、1.06倍和1.58倍。发酵液用作治疗剂时:PAL、POD、PPO、SOD和CAT活性分别在喷发酵液后第2d、第4d、第3d、第2d和第2d达到峰值,比同时期清水对照高1.87倍、1.39倍、3.68倍、1.60倍和1.64倍。膜脂过氧化的主要产物MDA含量测定结果表明,TD-1发酵液对番茄植株没有伤害。
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