研究背景及目的 DNA聚合酶(DNA polymerase)是1956年由科恩伯格(Kornberg)在大肠杆菌中首先发现的,又称Kornber酶。后来陆续地在其他原核生物及微生物中也发现了它的存在。目前已知DNA聚合酶是一个大家族,迄今在真核生物中至少有14种DNA聚合酶,成员包括聚合酶α、β、γ、δ、ε、ζ、η、θ、ι、κ、λ、μ、REV1、MUS308。它们在真核细胞DNA的复制、修复、跨损伤合成、DNA重组以及细胞周期调控等多种重要的生物代谢过程中发挥重要作用。DNA聚合酶β是由Weissbach等人在牛胸腺细胞中分离出的单肽链小分子蛋白质,广泛存在于哺乳动物的细胞核内。DNA聚合酶β被认为是一种看家基因,在从酵母到哺乳类细胞中高度保守。人类细胞DNA聚合酶β的编码基因单拷贝存在于8P12-P11,总长度为35Kb,由14个外显子及13个内含子组成。一级结构为一条由335个氨基酸组成的多肽,是目前已知的聚合酶中分子量最小的。对于恶性肿瘤的发病机理,以往的研究多集中在癌基因和抑癌基因的突变上,然而引起这些基因突变积累成肿瘤的最初的分子缺陷还不太清楚。随着分子生物学的进展,人们相继在结直肠癌、前列腺癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、肾癌、膀胱癌以及食管癌中发现了polβ基因的突变,随之polβ基因和肿瘤之间的关系日渐引起人们的关注。研究发现,DNA聚合酶β在哺乳动物细胞中参与了DNA合成和修复的某些过程,它们可监测DNA的错误,切除掉损伤的DNA片段,修复好DNA的缺口,从而保证了DNA的稳定性,阻止了基因突变导致的细胞突变和肿瘤的生成。Eca109、Eca9706和NIH3T3是分别来源于低分化和高分化食管鳞癌以及小鼠成纤维细胞边沿系的细胞系。这三种