地塞米松刺激THP-1细胞释放具有促凝血功能的组织因子阳性膜微粒

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研究目的:探究激素刺激下,单核细胞所释放的膜微粒和组织因子(TF)阳性膜微粒的数量、促凝血功能。组织因子的表达和作用,以及激素对单核细胞内组织因子表达的影响。内毒素对单核细胞的作用是否能被激素促进或者抑制。研究方法:选用人单核细胞肿瘤细胞系THP-1为研究对象。用地塞米松0.1mM、0.01mM、0.001mM三种不同浓度分别刺激4h、12h、24h后,用流式细胞仪检测上清液中组织因子阳性膜微粒和总膜微粒的数量,以及TF阳性膜微粒所占比例。用一期法凝血时间测定细胞上清液的促凝血活性。用CD14抗体捕获膜微粒,测定膜微粒相关的组织因子活性。用荧光实时定量PCR测定细胞中组织因子的mRNA水平。研究结果:除4h-0.001mM组外,激素刺激组释放的TF阳性膜微粒数量比基础值高出1.5-3倍,总膜微粒高出基础值1.3-2.5倍。地塞米松的剂量与TF阳性膜微粒数量正相关(r=0.673,p<0.001),与总膜微粒数量正相关(r=0.804,p=0.001)。激素对LPS刺激THP-1细胞释放TF阳性膜微粒没有促进作用。地塞米松刺激THP-1细胞后释放的TF阳性膜微粒表面的TF具有活性。地塞米松刺激THP-1细胞的上清液的凝血时间比阴性对照缩短(p<0.05),4h组和24h组的凝血时间与同一样本的上清液中TF阳性膜微粒数量负相关(4h r=-0.762p=0.028;12h r=-0.833p=0.010).地塞米松刺激4h时显著减少了TF-mRNA的水平(p<0.01),0.01mM浓度在12h和24h刺激时间能增加TF-mRNA (p<0.01)。TF-mRNA水平与凝血时间没有相关性。结论:地塞米松刺激THP-1细胞释放高于基础量的TF阳性膜微粒,这些膜微粒具有TF活性,其数量与地塞米松剂量正相关,与促凝血作用强度存在一定的相关性。地塞米松的这种作用不是来源于转录水平的调控。
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