赭曲霉毒素A（OTA）是由某些曲霉属和青霉属真菌产生的一种次级代谢产物,具有较强的肾毒性和潜在致癌性,广泛存在于霉变的谷物和饲料中,与食品安全及人类健康关系密切。因此,有效的OTA脱毒方法至关重要,生物脱毒因其降解毒素特异、迅速,不易导致食品风味品质的变化而被广泛关注。目前的研究多停留在微生物解毒评估的阶段,仅有少数有效的生物酶被发掘,并且大多数生物酶的脱毒效率欠佳。寡养单胞菌CW117是一株从受多环芳烃严重污染的土壤中分离获得,可以高效降解黄曲霉毒素以及赭曲霉毒素的双功能降解菌株。本研究在实验室原有实验结果基础上,结合该菌株的生物组学以及目前已知的赭曲霉毒素降解机制及途径,预测可能的OTA降解酶,并成功筛选得到一种具有高效降解OTA能力的解毒酶,并将其命名为ADH3。本实验对所预测的关键酶基因adh3进行分子克隆后与载体pGEX-4T-1连接构建表达载体并转化入E.coli BL21（DE）3感受态,通过原核表达得到重组蛋白,ADH3分子量约为47.1 kDa,重组蛋白rADH3分子量约为73.1 kDa（含有GST标签）。在大肠杆菌表达体系中,该重组酶主要以包涵体形式存在,通过超声破碎后,上清中得到极少量的可溶性蛋白,但该重组蛋白对OTA显示了极高的降解活性。将降解产物使用OTA免疫亲和柱进行富集净化并通过LC-MS/MS对纯化后的样品进行定性检测,发现降解产物中存在OTα。本实验室在先前的工作中已经从CW117中筛选得到一个OTA降解酶CPNA,为验证该菌株中除降解酶CPNA以及ADH3外,是否还含有其他OTA降解酶,将cpna以及adh3基因从CW117基因组中缺失,双基因缺失株CW117△cpna-adh3完全失去了 OTA降解活性。当CW117基因组中仅缺失cpna时,缺失株CW117△Cpna在生长6h时其降解率显著低于野生型,但生长9 h后降解率与野生型相当。将cpna以及adh3分别互补入双基因缺失株中,两种基因的互补株均可以恢复OTA降解活性,并且adh3互补株CW117（△cpna-adh3）+adh3的降解活性远高于cpna互补株CW117（△cpna-adh3）+cpna。通过荧光定量PCR检测经不同浓度OTA诱导后CW117中adh3基因表达量变化,发现随着OTA浓度的升高,两种基因相对表达量也在升高,表明cpna及adh3基因表达具有底物诱导特性,cpna基因的缺失,在一定时间内可影响adh3基因的表达。研究结果表明菌株CW117降解OTA分子机制为cpna及adh3协作降解作用,以adh3降解作用为主,但cpna缺失对adh3表达具有一定影响;OTA可通过两种降解酶的协作水解转化为等摩尔质量的OTα。