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目的:
通过检测重度子痫前期患者及正常孕妇外周血CD3+CD8+T细胞表面抑制受体NKG2A和活化受体NKG2D两种受体的表达,研究外周血CD3+CD8+T细胞在子痫前期中功能变化,以探索子痫前期的发病机制,寻找新的防治思路。
方法:
一、研究对象
选取2012年5月至2012年12月在盛京医院产科住院的孕妇为研究对象。病例组为重度子痫前期(依据乐杰主编第七版《妇产科学》教材的诊断及分类标准)患者15例,年龄28.6±5.64岁,孕周为35.9±1.97周。对照组为正常妊娠妇女15例,年龄27.5±4.77岁,孕周为35.9±2.00周。经统计学检验两组孕周及年龄无显著差异,既往无高血压、糖尿病、免疫系统疾病及其特殊疾病史,无妊娠合并症,未服用免疫抑制或增强药物,均为初产妇、单胎妊娠。
二、流式细胞术检测NKG2A和NKG2D
各组妇女空腹采取肘静脉血2ml,加入EDTA抗凝剂中。将新鲜标本采用淋巴细胞分离液提取出单个核细胞,设两个试管,实验管及阴性对照管。实验管中依次加入抗体CD3-PerCP、CD8-FITC各20μl、NKG2A-APC10μl,NKG2D-PE5μl,对照管中加入抗体CD3-PerCP、CD8-FITC各20μl及PBS15μl,然后向每管中加入提取的单个核细胞悬液50μl。加样完毕后,震荡混匀,避光静置30分钟。各试管中依次加入400μlPBS,重悬,采用流式细胞术检测CD3+CD8+T细胞表面受体NKG2A、 NKG2D的表达状况。
三、统计学方法处理
实验数据采用SPSS17.0统计软件包对计量资料进行t检验。P<0.05为差异有统计学意义。
结果:
重度子痫前期组外周血CD3+CD8+T细胞表面抑制受体NKG2A表达为54.52%±28.58%,显著低于正常妊娠组80.61%±10.55%,t=3.315,有统计学意义(P<0.01)。两组CD3+CD8+T细胞表面活化受体表达分别为86.19%±22.04%与93.91%±8.52%,无统计学意义(P>0.05)。
结论:
重度子痫前期患者CD3+CD8+T细胞表面抑制受体NKG2A表达较正常妊娠妇女明显降低,激活受体NKG2D表达有增高趋势,虽无统计学意义,提示子痫前期患者免疫平衡失调,CD3+CD8+T细胞可能通过其表面的受体的变化,参与子痫前期病理生理过程。