转化医学理念指导下的芍药甘草汤对实验性免疫性葡萄膜炎作用的研究

来源 :山东中医药大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:yumenglu
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目的:1.基于文献研究明确“肝开窍于目,从肝治目”的深层次含义,在肝目皆体阴而用阳的理论基础上,明确肝体阴虚失柔致火热上炎是葡萄膜炎的潜在病机,眼部热象为标,肝性失柔为本,确立柔肝法在葡萄膜炎治疗中的作用;在病证结合、方证相宜原则指导下将柔肝缓急的代表方芍药甘草汤引入葡萄膜炎的治疗。2.在转化医学理念指导下,观察不同配比的芍药甘草汤对EAU大鼠眼部体征、病理学损伤的改善,及对大鼠血清和脾脏淋巴结中IFN-γ、IL-10、IL-17表达量及Th1/Th2平衡的影响,阐明经方芍药甘草汤干预葡萄膜炎的深层作用机理,为临床辨证用药奠定基础。方法:1.理论研究采用中医药传承软件辅助系统,对中华医典中收录的临证各科眼科中的所有古籍中涉及“芍药”、“白芍”、“炒白芍”、“赤芍”的方剂进行统计分析,通过对用药频次统计、基于关联规则分析的组方规律、基于熵方法的用药规律以及相关药物性味归经规律的分析,明确内障眼病和外障眼病的论治规律特点。现代文献研究选取近20年中国知网论治葡萄膜炎方药中含有“白芍”“甘草”或“赤芍”“甘草”且方药剂量齐全的临床研究文献统计分析。2.实验研究采用IRBP-R16混合CFA及结核杆菌反复3次皮下注射建立大鼠EAU动物模型,按文献研究中确立的芍药甘草较常见的三种配比1:1、2:1、3:1组成的芍药甘草汤对大鼠灌胃干预;采用数码裂隙灯动态观察免疫后各组大鼠的眼部炎症表现,并进行眼前节拍照。记录分析造模5天、12天(灌胃1周)、19天(灌胃2周)的眼部体征变化;灌胃2周后行眼部病理学观察,HE染色,观察分析形态学改变及炎性细胞浸润情况;检测大鼠血清和脾脏淋巴结中IFN-γ、IL-10、IL-17表达量及比值的变化。结果:1.古籍中数据统计显示,外障眼病和内障眼病的用药归经均以肝经频次最高,其次为脾经、心经,充分体现了肝开窍于目,目病从肝论治。药味统计结果显示,以甘、苦、辛、酸为主,是“肝苦急”、“急食甘以缓之”、“酸以补之”、“辛以散之”、“焦苦以助之”的调肝治肝法在眼病治疗中的体现,说明古籍中对内外障眼病从肝论治时,甘以缓急,辛、苦以调理肝用的同时注重配伍酸味药物以补肝体,体现了柔肝养肝的法则,体用同调。高频药物为白芍、当归均入肝经,二药既可以滋肝阴、养肝血,又是柔肝之要品,体现重视养肝柔肝的原则。2.现代文献研究:共纳入文献40篇,结果显示白芍出现4次,赤芍32次,赤白芍共用4次,说明目前临床对本病更多的考虑其肝经实证病变,以清泻肝火为主,没有充分考虑到本病的潜在病机,重标轻本。3.不同配比的芍药甘草汤对EAU大鼠眼部体征影响,灌胃1周后,治疗各组与模型组相比稍好转,灌胃2周即大鼠免疫19天后,治疗各组与模型组相比有明显好转,表现为睫状充血消失,前房正常,房水微混,虹膜血管正常,瞳孔区渗出物消失,可见眼底红光反射,其中以配比3组的评分与空白组最为接近。4.不同配比的芍药甘草汤对EAU大鼠病理学影响,结果显示模型组大鼠视网膜各层结构排列紊乱,迂曲;细胞增生,部分细胞空泡变性;细胞间距轻度不一,各层间炎细胞浸润。配比1、2、3组,神经节细胞层、内网状层仍有不同程度的炎细胞浸润。其中配比2组、3组程度较轻,仅有散在的中性粒细胞浸润,配比1组可见部分细胞变性,细胞间距不一,血管有轻度增生。5.不同配比的芍药甘草汤对EAU大鼠IFN-γ、IL-10、IL-17表达及Th1/Th2平衡影响,灌胃2周后大鼠血清、脾淋巴细胞因子检测显示,经芍药甘草汤干预治疗,致炎因子IFN-γ、IL-177水平呈下调趋势,拮抗炎症因子IL-10水平呈上升趋势,可不同程度上纠正Th1/Th2的失衡。结论:1.眼科古籍的统计结果显示,治疗内外障眼病均以肝经为主,药味以甘、苦、辛、酸为主,高频药物显示当归、白芍使用频次最高,二药既可以滋肝阴、养肝血,又是柔肝之要品,体现了古人从肝论治目病时重视养肝柔肝的原则。2.研究明确了肝体阴虚失柔,致火热上炎是瞳神紧小的潜在病机,眼部热象为标,肝性失柔为本,当治以柔肝缓急,以芍药甘草汤加减论治,方证相宜,能标本兼治,可兼顾现代文献以清肝为主,忽视阴柔和肝之不足。3.文献研究对芍药与甘草均明确标明剂量的资料,进行配比分析发现,较常见的三种配比1:1、2:1、3:1,为后期动物实验的剂量配比提供参照。4.经不同配比的芍药甘草汤治疗后,EAU大鼠眼部炎症评分及组织病理学评分较模型组显著改善,说明芍药甘草汤能够抑制EAU大鼠的病情,其中又以3:1时效果佳。5.芍药甘草汤治疗葡萄膜炎的可能机制为纠正其失调的免疫机能,纠正Th1/Th2的失衡,从根本上恢复机体的阴阳平衡来实现。
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