慢病毒介导的靶向血管生成素2(Ang-2)的siRNA对人胰腺癌抑制作用的体内实验研究

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第一部分Ang-2在胰腺癌中表达的意义及相关性目的研究胰腺癌组织中血管生成素2(Angiopoietin-2,Ang-2)和微血管密度(microvessel density,MVD)的表达及之间的关系。方法应用免疫组化(IHC)S-P法检测30例胰腺癌组织中Ang-2的表达和分布,同时检测MVD作为判断血管生成的指标,并以相应正常胰腺组织作为对照,比较两组间的差异。分析Ang-2与MVD之间的相关性以及之间的关系。结果Ang-2和MVD在胰腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织, 30例胰腺癌组织中Ang-2阳性率为56.7%,正常胰腺组织中Ang-2阳性率为6.6%,两者差异有统计学意义。30例胰腺癌组织的MVD值为35.4±3.2,正常胰腺组织的MVD值为14.2±2.9,两者的差异有统计学意义。结论胰腺癌组织中Ang-2呈过量表达,且MVD明显高于正常组织。Ang-2的表达与MVD呈显著正相关。Ang-2可通过促进胰腺癌血管生成从而在胰腺癌的发生发展中起重要作用。第二部分Ang-2-siRNA对人胰腺癌抑制作用的体内研究目的在动物体内环境研究Ang-2-siRNA对人胰腺癌生长、转移和浸润行为的抑制作用。方法建立人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型。随机分为实验组、阴性对照组和空白对照组,按2×109TU标准在瘤内分别注射实验病毒(LV-Ang-2-siRNA)、空病毒(LV-GFP)和生理盐水,观察抑瘤效果。处死裸鼠并取下肿瘤标本后用IHC S-P法检测Ang-2蛋白表达及MVD值,并用TUNEL和透射电镜检测肿瘤细胞凋亡,计算凋亡指数。结果实验组皮下移植瘤生长明显受抑制,体积和重量明显小于阴性对照组和空白对照组(体积,F=1508.6,P=0.0001;重量,F=77.560,P=0.0001),Ang-2蛋白表达弱于对照组(F=29.148,P=0.0001),MVD值明显小于对照组(F=7.185,P=0.005),凋亡指数明显大于对照组(F= 16.289,P=0.001)。结论在体内实验中,Ang-2-siRNA能明显抑制人胰腺癌的生长,通过减少新生血管形成来促进肿瘤凋亡,显示出一定的抑瘤效应。
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