竹有效成分的提取及钙拮抗作用的研究

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现代病理学研究发现冠心病与Ca2+大量进入心血管细胞质有重要关系,衰老细胞中都含有大量的钙和色素沉积;细胞内Ca2+超载将引起多种生理功能混乱,如心电图异常、衰老、癌变等。因此,调控细胞膜钙通道,使细胞内Ca2+保持正常稳定态,即通过药物或其它物质阻滞细胞膜上的钙通道或激发细胞内多余的Ca2+外溢(该药物或其它物质通称为钙拮抗药物),对多种疾病防治具有重要意义。研究发现竹叶、竹枝、竹杆中除含有纤维素、半纤维素、糖、氨基酸和多种矿物物质外,还含有丰富的的黄酮类化合物及多糖类化合物。近年来还发现竹叶黄酮与银杏叶黄酮有相似的化学组成,它们都有抗脂质过氧化物、清除自由基、调节血脂、抗炎、抗菌、抗突变、抗肿瘤、抗病毒、保肝等生理活性。许多植物中含有的多糖是免疫调节剂,如黄芪多糖可促进人体的免疫功能,从香菇分离的香菇多糖具有β(1→3)-D-葡萄糖糖链,具有明显抑制动物肿瘤生长的作用。由于植物中黄酮类、多糖类化合物成分与人类健康有密切的关系,其研究正引起广泛的关注。本文对慈竹、黄竹的各提取物进行了黄酮含量及多糖含量分析,并采用45Ca示踪技术技术,检验竹提取物是否具有钙拮抗作用,以及其钙拮抗作用是否与黄酮、多糖类化合物有关联。在进行45Ca跨膜内流实验的同时,还进行了45Ca跨膜外溢实验。最后检验了慈竹碱提取物对异丙肾上腺素(ISO)和结扎冠状动脉所致大鼠心肌缺血是否具有保护作用。结果表明,慈竹、黄竹的竹叶、竹枝、竹杆的蒸馏水、碱水(饱和石灰水)、酸水(1mol/L的HCl水溶液)、70%乙醇、95%乙醇提取物中,其提取率都以碱提取物的提取率最高。竹提取物黄酮类化合物的显色定性反应的结果显示,各种提取物中均含有黄酮类化合物。无论是慈竹还是黄竹,70%乙醇竹叶提取物的黄酮及多糖含量是最高的,而通过45Ca跨膜测量得出,碱提取物的钙拮抗作用最强,这说明提取物中的黄酮、多糖类化合物含量与其钙拮抗作用之间没有明显的直接的对应关系,即黄酮、多糖类化合物含量高的提取物的钙结抗作用不一定明显。其中选取慈竹杆碱提,测量其45Ca内流以及外溢的计量-效应关系(即竹提取物浓度增高,Ca2+内流相应减少,外溢相应增加),结果显示竹提取物的钙拮抗作用符合计量-效应关系。通过测量碱提取物的柱层析分离物的钙拮抗作用,其结果显示钙拮抗作用大大降低,这有可能是竹提取物中的活性成分相互作用后才能产生钙结抗作用的结果,即中药的配伍协同理论,如果将其活性成分分离,则各个成分并不显示钙结抗作用。通过注射ISO和结扎冠脉所致大鼠心肌缺血后,结果显示,慈竹碱提取物对ISO和结扎冠状动脉所致大鼠心肌缺血具有保护作用。
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