春兰组织培养技术体系研究

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本研究以春兰(Cymbidium goeringii)的茎尖、侧芽和根状茎为外植体进行组织培养技术体系的研究,重点研究了春兰初代培养、继代增殖、生根培养的最佳培养基配方,并对试管苗炼苗移栽介质进行了选择,结果表明: 1)适宜侧芽灭菌的方法:用75%的酒精浸泡10秒,无菌水冲洗2-3次,再用0.1%的升汞(加两滴Tween20)溶液消毒8-10min,用无菌水冲洗4-5次,剥去外面1-2叶片,再用0.01%升汞液浸泡1-2min,无菌水冲洗4-5次。 2)茎尖、侧芽的取材季节最好在4-6月份,此时不仅数量多而且成活率高。取材过早(2、3月份)和过晚(7-9月份)的培养效果都不好。 3)在类原球茎诱导时,通过采用暗培养,适当降低培养温度、减少伤口面、多次转瓶和加入2.0g/L的活性炭等措施,可减轻褐化死亡。 4)适宜类原球茎诱导的培养基为:1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L+AC2.0g/L,诱导率为36.9%。 5)适宜不定芽诱导的培养基为:1/2MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+AC2.0g/L,芽诱导率达37.5%。 6)适宜芽苗增殖的培养基配方为:1/2MS+NAA0.2mg/L+6-BA2.0mg/L+AC2.0g/L,增殖倍数为2.67。 7)类原球茎增殖的适宜培养基为:1/2MS+NAA2.0mg/L+6-BA0.5mg/L+AC1.0g/L,50天增殖系数可达5.17。 8)适宜不定芽的生根壮苗培养基为:1/2MS+NAA2.0 mg/L+椰汁15%+AC2.0g/L,30天生根率达81.3%。 9)类原球茎分化的芽的生根培养以1/2MS+NAA2.0mg/L+IBA1.0mg/L+6-BA0.1-0.5mg/L+AC2.0g/L较好,50天生根率可达85.6% 10)移栽介质以苔藓最好,成活率达96%。
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