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心血管疾病的发病率和死亡率日益增加,在全球范围内造成重大的经济负担。心血管疾病过程中经常并发心肌肥厚,心肌肥厚在心机重构过程中发挥重要作用。心肌肥厚的长时间持续性发生会引起心功能减弱,最终导致心衰甚至死亡。研究表明多种微小RNA(microRNA,miRNA)参与心肌肥厚的病理过程,并发挥重要作用。目的:microRNA-214-3p(miR-214-3p)在心肌肥厚中的作用机制目前尚未阐明,本文旨在利用小鼠心肌肥厚动物模型和乳小鼠心肌细胞肥大模型,研究miR-214-3p调控心肌细胞肥大的作用的分子机制。方法:1.Ang-Ⅱ胶囊渗透泵(1.46 mg/kg,2周)建立C57BL/6小鼠心肌肥厚的动物模型,尾静脉注射agomiR-214-3p(胆固醇修饰的miR-214-3p模拟物)增加小鼠心肌miR-214-3p水平。2.小动物心脏B超检测小鼠心脏结构和功能的变化。3.原代分离培养C57BL/6乳小鼠心肌细胞(NMVCs),用10-8M Ang-Ⅱ诱导心肌细胞肥大模型。4.麦胚凝集素(WGA)染色检测小鼠心肌组织中心肌细胞表面积。5.FITC-鬼笔环肽染色检测乳小鼠心肌细胞面积。6.双荧光素酶报告基因实验鉴定miR-214-3p与MEF2C 3’UTR的结合作用。7.细胞免疫荧光法检测NMVCs中P65的核转移。8.RT-qPCR和Western Blot法分别检测miR-214-3p和相关基因表达。结果:1.Ang-Ⅱ灌注可诱导小鼠心肌肥厚,心肌中心肌细胞面积显著增大,肥厚相关基因ANP、ACTA1和β-MHC的mRNA和蛋白表达显著上调,miR-214-3p出现明显下调表达的现象。小鼠体内过表达miR-214-3p可明显抑制Ang-Ⅱ的诱导小鼠心肌肥厚作用,减少小鼠心肌中心肌细胞面积增加和肥厚相关基因表达。2.Ang-Ⅱ有效诱导NMVCs肥大,显著增加心肌细胞中ANP、ACTA1和β-MHC的mRNA和蛋白表达,并上调miR-214-3p表达。3.过表达miR-214-3p及沉默MEF2C均能一致性地抑制Ang-Ⅱ诱导的乳小鼠心肌细胞的肥大表型。4.证实MEF2C是miR-214-3p作用的靶基因,MEF2C在发生肥厚的小鼠心肌组织和肥大的小鼠心肌细胞中表达均显著上调。5.Ang-Ⅱ可增加小鼠心肌细胞NF-κB P65的核转移,激活NF-κB P65通路。6.激活NF-κB通路能显著增强miR-214-3p表达,阻断NF-κB通路可显著抑制Ang-Ⅱ诱导的miR-214-3p表达增加。结论:1.成功建立Ang-Ⅱ灌注诱导的小鼠心肌肥厚模型,miR-214-3p在肥厚小鼠心肌组织中表达显著下调,而过表达miR-214-3p能显著抑制Ang-Ⅱ诱导的小鼠心肌肥厚。2.miR-214-3p在Ang-Ⅱ诱导的肥大的NMVCs的小鼠心肌细胞中表达上调,过表达miR-214-3p可显著抑制Ang-Ⅱ诱导的心肌细胞中肥厚标志基因的表达增加。3.MEF2C是miR-214-3p的作用靶基因,MEF2C介导miR-214-3p抑制Ang-Ⅱ诱导的小鼠心肌细胞肥大。4.Ang-Ⅱ激活NMVCs的NF-κB通路,NF-κB通路介导Ang-Ⅱ上调小鼠心肌细胞中miR-214-3p表达。