核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary)是世界粮油作物、蔬菜等农作物上分布最广、为害最严重的真菌病害之一。由于核盘菌的寄主范围广泛,病害循环复杂,缺乏有效的抗病品种,目前对于作物菌核病的防治缺乏安全有效的措施。在真菌中广泛存在着真菌病毒,部分真菌病毒可减弱寄主真菌的致病力,从核盘菌中挖掘弱毒相关的病毒可以为作物菌核病的防治提供新的材料。本研究以四川省发病油菜上的菌核分离筛选获得核盘菌菌株8-2-3为研究材料,初步研究了该菌株生物特性及其携带病毒的分子特性。菌株8-2-3在PDA培养基上生长较慢,菌丝纤细,对油菜的致病能力弱,是一株典型的弱毒菌株。经过初步研究表明该菌株携带3种病毒,包括2种ds RNA病毒和一种新的单股负链病毒。我们对ds RNA病毒进行了c DNA克隆,发现其中的一种病毒为双分病毒,命名为核盘菌双分病毒3(Sclerotinia sclerotiorum partitivirus 3,Ss PV3)。Ss PV3的基因组由两条ds RNA片段组成,ds RNA1全长1793 nt,只含有一个编码Rd RP的ORF;ds RNA2全长1566 nt,含有一个ORF,编码外壳蛋白CP;病毒粒体为球形,直径约为22-28 nm;另一种ds RNA病毒为Sclerotinia sclerotiorum botybirnavirus 3(Ss BRV3),其基因组结构由两条ds RNA片段组成,分别与Bp RV1具有96%和83%的序列同源性,序列同源性分析表明该病毒和Bp RV1属于同一种病毒属的不同菌株;Ss NSRV3(Sclerotinia sclerotiorum negative single-stranded RNA 3)基因组全长预计超过10 Kb,目前在3’端和5’端分别获得4672 nt和2081 nt序列。Ss NSRV3含有三个单股负义链RNA病毒(Mononegaviruses)m RNA加帽相关的保守结构域,分别为Virus-capping甲基转移酶(Methyltrans_Mon,pfam14314,8.50e-44),单股负链病毒m RNA-capping结构域V(Mononeg_m RNAcap,pfam14318,1.68e-24)和副粘病毒m RNA加帽酶(Paramyx_RNAcap,TIGR04198,4.30e-20)。对已有的序列进行系统进化分析表明Ss NSRV3为弹状病毒科的一个新成员,与未分类的弹状病毒亲缘关系最近,可能为一个新的属。通过原生质体再生获得一株携带Ss BRV3和Ss PV3的菌株9-22与一株只携带Ss PV3的菌株P4,对其生物学特性进行研究发现菌株9-22菌落形态正常,可形成成熟的菌核,P4生长速度正常,菌丝粗壮且茂密,不产生色素,也不能形成菌核,致病力弱。Ss PV3在核盘菌中非常稳定,很难通过原生质体再生脱除,Ss PV3和Ss BRV3都能克服营养体不亲和,通过菌丝之间的接触进行传播,但传播效率很低;Ss NSRV3与核盘菌弱毒相关,不能通过营养体不亲和群之间的菌丝接触而传播,也容易脱除。