肠缺血再灌注损伤小鼠TREM-1表达的改变及意义

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目的:建立小鼠肠缺血再灌注损伤模型,观察小鼠小肠缺血再灌注损伤后TREM-1的表达及其与炎症因子水平变化的关系。方法:雄性清洁型昆明小鼠72只,随机分为正常对照组(N=8)、假手术组(S=32)、小肠部分缺血再灌注损伤组(R/I=32)。实验组通过手术用无损伤血管夹夹闭肠系膜上动脉起始部,20分钟后松夹恢复肠系膜上动脉血流制成肠缺血再灌注后模型;假手术组只进行同样的手术操作但不夹闭肠系膜上动脉;正常组不作手术。分别于缺血再灌注后6h、12h、24h和48h,ELISA测定外周血清中s TREM-1、TNF-α的水平并进行相关性分析;取小肠组织病理检查,免疫组织化学法观察TREM-1在小肠组织中的表达情况;Wsternblot检测肝组织TREM-1蛋白的表达。结果:1. ELISA测外周血清中R/I组6h、12h、24h和48hs TREM-1浓度(312.34±40.72、614.67±41.77、1272.88±295.52、、774.65±132.58)显示在各时间点与对照组及假手术组比较增高显著(P<0.01),且组内比较在缺血再灌注24h后达到峰值(F=47.636P<0.01);R/I组6h、12h、24h和48hTNF—α值(29.89±4.20、33.03±4.12、94.01±9.44、65.25±3.87),12h开始升高,24h达峰值(F=260.615P<0.01);在肠缺血再灌注6-48h外周血清中s TREM-1和TNF—α浓度的变化呈正相关(r=0.840,P=0.000);2.小鼠小肠组织在肠缺血再灌注光镜下显示R/I6h组变化不明显;12h组可见粘膜开始变短,水肿;24h组可见绒毛受损严重,排列紊乱且脱落明显,间质水肿;48h组绒毛排列不整齐,长短不一,脱落较24h组少,间质水肿亦有所减轻。免疫组织化显示小肠组织在缺血再灌注损伤后TREM-1表达增高,24h时最强,且阳性部位主要是小肠粘膜细胞;3.Wsternblot检测显示小鼠缺血再灌注肝组织内TREM-1蛋白表达上调24h时最明显,假手术组轻度表达,正常组不表达。结论:1.sTREM-1在肠缺血再灌注肠黏膜损伤的早期变化,可作为临床上早期判断肠缺血再灌注肠黏膜损伤的检测方法;2.小鼠小肠缺血再灌注损伤后,小肠组织TREM-1的表达上调是导至肠粘膜屏障功能下降及系统性炎症反应的重要环节,调控TREM-1可能成为肠功能障碍治疗的新方法。
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