三株真菌的次生代谢产物研究

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植物内生菌是指那些在其生活史的一定阶段或全部阶段生活在健康植物的各种组织和器官内部的真菌或细菌。感染内生菌的植物宿主往往具有生长快速、抗逆境、抗病害、抗动物危害等优势,比未感染的植株更具有生存竞争力。内生菌发挥这些作用的物质基础是其丰富多样的次生代谢产物,它们往往具有多种生物活性和/或新颖的结构,在农业和/或医药业中具有重要的应用前景。海洋微生物为了适应海洋具有高盐、高压、低温、低光照和寡营养等特点的恶劣生态环境,产生了与陆地生物不同的代谢系统和机体防御系统,因此从海洋微生物的代谢产物中发现了许多具有特异化学结构的生物活性物质。植物内生菌和海洋微生物已经成为天然药物的重要资源,具有非常重要的研究意义和广阔的开发前景。 本论文对两株植物内生真菌和一株海洋真菌的次生代谢产物的结构和生物活性进行了研究,一共得到了23个化合物,鉴定了其中19个化合物的结构,其中4个是首次发现的新化合物,从中筛选出2个具有强活性的体外抗幽门螺旋杆菌化合物和1个具有显著体外舒血管作用的物质,并发现了3个具有较强抗菌作用的化合物。具体分述如下:CY018是从狗牙根(Cynodondactylon)叶中分离得到的曲霉属(Aspergillussp.)内生真菌。利用硅胶、ODS、葡聚糖凝胶和高压液相等柱层析技术,从CY018的固体发酵产物中分离得到13个化合物,综合运用各种波谱方法(IR、MS、1H-NMR、13C-NMR、DEPT、HMQC、HMBC和NOESY等)鉴定了11个化合物的结构,其中1个为首次发现的化合物(3),并修正了1个已知化合物(5)的1H-和13C-NMR数据归属。抗菌活性试验结果表明:化合物5-8对白色念珠菌(Candiaalbicans)具有较强的抑制作用,其MIC分别为62.5,125,62.5和250μg/ml;化合物3-13都对枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)具有一定的抑制作用,其MIC在62.5~125μg/ml之间。体外抗幽门螺旋杆菌(Helicobacterpylori)试验表明化合物4和7对幽门螺旋杆菌具有很强的抑制活性,其MIC分别为10.0μg/ml和8.0μg/ml(作为阳性对照的氨苄青霉素的MIC为2.0μg/ml);对ConA(刀豆蛋白)所致的脾淋巴细胞增殖的抑制作用的研究表明化合物5具有较强的体外免疫活性,在5×10-5g/ml及以上浓度时对正常脾淋巴细胞有一定的毒性作用,其各浓度对ConA所致的脾细胞增殖都有一定的抑制作用,其IC50在2×10-5g/ml与5×10-5g/ml之间;对化合物5及其盐酸盐的体外血管舒张作用的研究表明5及其盐酸盐是有效的舒张血管物质,其舒张血管的效应不具有内皮依赖性,但与Ca2+通道有密切关系。该株内生菌具有很好的研究开发前景。 IV403是从黄花蒿(Artemisiaannua)茎中分离出的小球腔菌属(Leptosphaeriasp.)内生真菌,利用硅胶柱层析结合SephedaxLH-20柱层析从其发酵液的乙酸乙酯提取物中分离得到两个具有新骨架的化合物,经UV、IR、NMR(1H-和13C-NMR、DEPT、HMBC和HMBC)和MS等波谱技术鉴定为3,4,7-三甲基-7-乙基-7,8-二氢-8-羟基-6H-苯并[c]吡喃-6-酮和3,1′,4′,6′-四甲基-4-(3′-环庚烯-2′-酮)-2-丁烯酸,并利用CD结合NOED确定了它们的绝对构型。这两个化合物分别被命名为小球腔菌酮和小球腔菌酸,丰富了天然萜类化学的内涵。 Z16是从白姑鱼(Argyrosomusargentatus)精巢中分离得到的黑粘座孢霉属(Myrotheciumsp.)海洋真菌,其发酵液的乙酸乙酯提取物具有较强的抗菌活性,并有一定的致皮肤过敏作用。利用硅胶、ODS、葡聚糖凝胶和高压液相柱层析从中分离得到8个化合物,综合运用各种波谱技术鉴定了其中6个化合物的结构,其中1个为首次测定结构的化合物。体外抗菌作用研究表明化合物15、16和17具有强的抗菌作用,可能是该真菌发酵EtOAc提取物具有抗菌作用的物质基础,这3个化合物还可能是该提取物具有致皮肤过敏的物质基础。 最后对近年来真菌的次生代谢产物作了简要综述。
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