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目的:建立一种快速而有效的巨细胞病毒(CMV)早期检测方法用于异基因外周血干细胞移植(allo—PBSCT)受者,并用以指导临床CMV活动性感染的早期诊断与治疗。方法:采用微粒子酶免疫分析法(MEIA)、间接免疫荧光法(IFA)及实时荧光定量PCR法(Real-time FQ-PCR)对42例allo—PBSCT患者移植后不同时间进行多点动态检测外周血CMV IgM抗体、CMV pp65抗原及CMVDNA负荷量。以20例PBSCT供者作为对照。同时采用流式细胞仪(FCM)定期检测allo-PBSCT患者T淋巴细胞亚群,收集临床资料,分析CMV活动性感染与临床预后的关系。结果:(1)移植组CMV pp65抗原阳性检出率(38.24%)及CMV DNA负荷量阳性检出率(33.82%)明显比CMV IgM抗体阳性检出率(21.50%)高,差异有统计学意义(χ~2=7.099 P=0.008,χ~2=3.891 P=0.049)。CMV pp65抗原阳性检出率与CMV DNA负荷量阳性检出率比较差异无统计学意义(χ~2=0.399,P=0.528),但两者之间成正相关关系(Spearman相关系数为0.653,P=0.000)。在PBSCT供者组中三种检测方法均未出现阳性。(2)42例患者移植后26例出现CMV活动性感染(61.90%),其中无症状感染15例、症状感染9例、CMV病2例。CMV pp65抗原及CMV DNA负荷量的阳性检出时间(75±64天,60±50天)明显早于CMV IgM(127±73天)(P＜0.05)。所有确诊的26例CMV活动性感染的患者全部给予更昔洛韦治疗。治疗后2周CMV DNA平均拷贝数为8.69×10~2基因拷贝/ml,明显低于治疗前4.75×10~4基因拷贝/ml(P=0.005)。CMV pp65平均5周转阴,IgM平均9周转阴。26例CMV活动性感染患者均全部治愈。(3)CMV活动性感染的发生与患者移植后细胞免疫功能低下、急性移植物抗宿主病(aGVHD)及其他移植相关并发症的发生密切相关(P＜0.05)。结论:(1)移植组中CMV pp65抗原和DNA负荷量阳性检出率明显高于IgM抗体,检出时间明显早于IgM抗体。pp65抗原和DNA负荷量的检测方法适合用于allo—PBSCT术后患者的CMV感染的早期诊断。移植术后动态检测CMV pp65、CMV DNA、CMV IgM并采取早期治疗,能显著降低CMV间质性肺炎(CMV IP)的发生率及死亡率,提高患者的长期生存率。(2)细胞免疫功能低下、aGVHD及其他移植相关并发症的发生是allo—PBSCT患者CMV活动性感染的危险因素。