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尿毒症毒素是指因肾脏功能下降而潴留于患者体内并且造成尿毒症症状的物质,蛋白结合类毒素作为重要的尿毒症毒素,越来越受到重视。蛋白结合类毒素除了肾脏毒性外,还与心血管事件、透析相关淀粉样变、肾性骨营养不良、皮肤瘙痒等诸多疾病密切相关,严重影响患者生存率及其生活质量。但蛋白结合类毒素在慢性肾脏病(chronic kidney disease CKD)患者体内的水平、其蛋白结合率以及与CKD进展的关系尚不明确,国内外研究较少。本研究旨在了解我国CKD患者蛋白结合类毒素水平和及其蛋白结合率,探讨肾功能与该类毒素水平之间的关系。本研究将112例CKD患者依据肾功能不同分为CKD3-5期3组,另外选取60例健康志愿者作为对照组。应用高效液相色谱-串联质谱(High performance liquid chromatagraphy-Tandem Mass Spectrometry HPLS-MS/MS)检测技术测定各组血清中马尿酸(hippuric acid;HA)、硫酸吲哚酚(indoxyl sulfate;IS)、硫酸对甲酚(p-cresyl sulfate;PCS)3-羧基-4-甲基-5-丙基-2-呋喃丙酸(3-carboxy-4-methyl-5-propyl-2-furan-propionic acid CMPF)的总浓度,并对e GFR与4种毒素水平之间进行相关分析;从CKD3-5期及健康组中分别入选10例,使用超滤法分离出游离HA、IS、PCS、CMPF,并测定其游离浓度、计算各物质在不同肾功能时期的蛋白结合率,了解游离浓度、蛋白结合率与肾功能变化之间的关系。健康对照组HA、IS、PCS及CMPF血清总浓度依次为0.80(0.4-1.30)μg/ml、0.96(0.54-1.26)μg/ml、1.45(0.49-2.93)μg/ml、0.92(0.45-1.89)μg/ml;CKD3-5期HA、IS、PCS及CMPF血清总浓度依次为(3期)1.50(0.98-2.33)μg/ml、1.97(1.15-4.47)μg/ml、3.97(1.20-5.68)μg/ml、2.60(1.09-3.34)μg/ml;(4期)5.45(2.53-7.33)μg/ml、5.35(3.50-7.93)μg/ml、9.75(5.25-13.49)μg/ml、2.93(1.50-4.50)μg/ml;(5期)12.45(5.43-13.73)μg/ml、16.23(6.72-22.04)μg/ml、19.14(11.76-33.98)μg/ml、3.71(1.13-4.79)μg/ml。各组HA、IS、PCS及CMPF的游离浓度为分别为:健康对照组(μg/ml)2.13(1.36-3.53)、0.11(0.07-017)、0.43(0.14-0.59)、0.26(0.24-0.28);CKD3期(μg/ml)2.88(1.76-5.63)、0.23(0.05-0.48)、0.96(0.56-2.08)、0.30(0.25-0.31);CKD4期(μg/ml)8.78(3.32-17.88)、0.55(0.26-0.91)、1.21(0.53-4.33)、0.32(0.29-0.50);CKD5期(μg/ml)24.05(3.56-62.55)、3.16(0.96-8.10)、5.42(0.62-12.83)、0.28(0.25-0.35)。健康对照组HA、IS、PCS及CMPF的蛋白结合率为(83.44±3.04)%、(98.73±0.55)%、(98.42±0.95)%、(96.66±2.65)%;CKD3-5期HA、IS、PCS及CMPF的蛋白结合率依次为(3期)(79.72±3.82)%、(99.18±0.45)%、(98.64±0.64)%、(95.89±3.52)%;(4期)(71.09+±7.66)%、(98.24±0.95)%、(98.26±0.73)%、(91.82±5.10)%;(5期)(61.22±7.62)%、(97.41±1.10)%、(96.85±1.51)%、(97.51±1.52)%。与健康对照组相比,CKD患者体内HA、IS、PCS及CMPF水平均明显升高(P<0.01);CKD3-5期,HA、IS、PCS的水平随肾功能下降出现明显升高(P<0.01),而CMPF血清水平无显著变化(P>0.05)。eGFR与CKD患者HA、IS、PCS及CMPF血清总浓度呈负相关关系。肾功能降低可导致CKD患者体内HA、IS、PCS及CMPF血清总水平升高,其中HA、IS、PCS升高较明显,而CMPF浓度变化不大。HA、IS及PCS的游离浓度在CKD后期出现升高,同时其蛋白结合率出现降低,CMPF的游离浓度及蛋白结合率无明显变化。CKD患者血清IS、PCS、CMPF与人血清白蛋白(Human serum albumin HSA)为较高强度结合,而马尿酸(hippuric acid HA)与HSA的结合相对较低。