目的：以在系统性红斑狼疮发病过程中具有重要作用的Th1/Th2细胞平衡关系为切入点，检测MRL/1pr狼疮小鼠Th1/Th2随疾病进展的表达变化，并探讨复方中药肾怡MRL/1pr小鼠肾损害的治疗作用及对Th1/Th2的调控。方法：MRL/1pr狼疮小鼠，随机分为8、16和24周龄组。在各个时间点上检测小鼠免疫器官(胸腺、脾脏)、血液和肾脏中Th1/Th2的表达。另取60只4周龄MRL/1pr狼疮小鼠，随机分为治疗组和对照组(每组30只)。治疗组经饲料喂服复方中药肾怡60 g/kg/d，对照组进食正常鼠饲料。比较治疗组和对照组在存活率、蛋白尿阳性率、肾脏病理改变和肾组织中Th1/Th2表达上的差异。为进一步探讨肾怡对Th1/h2的调控机制，应用流式细胞技术结合细胞分选检测肾怡对免疫器官(胸腺、脾脏)中Th1/Th2的调节作用，同时应用8192点小鼠基因芯片分析肾怡对肾组织微环境的重塑作用。结果：胸腺中几乎检测不到Th2细胞，脾脏和外周血中可以检测到Th2细胞，但Th1/Th2比值在各个年龄组当中没有显著差别。肾组织免疫组化结果显示，8周龄小鼠由于浸润的炎细胞较少，几乎检测不到阳性染色细胞。在16周龄和24周龄时可以看见这两 军医进修学阮博士学位个文 中丈摘要 种细胞因子均表达在血管周围浸润的炎性细胞胞浆中或其周围。 INF－Y阳性染色细胞所占平均百分比在 16周龄时为 19．6儿 在 24周龄时为22．州；IL一4F性染色细胞在16周龄时为27．8％， 在24周龄时为43．风。24周龄时IL一阳性染色的细胞百分比 高于NF－丫尸性染色细胞百分比（平均差值为20．7％，P＜0．05）。 复方中药能够延长狼疮小鼠的存活率门 3．3怔 7 0％）、减少尿蛋 白阳性率＊5怔 8叫），减轻肾小球与小血管的病变。24周龄时 治疗组小鼠同对照组相比，肾组织中IL一阳性染色细胞百分比 低于对照组（29．7％ VS 4 3．1％）；INF一 YF性染色细胞百分比没 有显著差异门0．6％VS 22．4们。在未加入叩A斗的条件下，脾 脏中Thl细胞和ThZ细胞的比值在对照组和治疗组中没有显著差 别；经PHAP刺激后对照组和治疗组ThZ细胞所占百分比均明显 增加，但治疗组中ThZ细胞所占百分比的增加程度以及ThZ八 比值明显低于对照组；对 CD4叫b Th细胞进行分选，提取mRNA 进行盯千CR检测，半定量结果显示治疗组m4可淋巴i田胞所表 达1卜4工＊一T（m2八hi）比值明显低 于对照组。利用基因芯片 分析肾脏基因表达谱，结果显示在进入研究的 819 2条基因中， 两组间差异表达门倍以上）的基因共279条，治疗组中下调基 因226条，其中包括免疫炎症、细胞外基质代谢等多个系统的相 关基因。其中某些成分，如几叶8BP和CD兆改变后可能影响肾 脏局部 Th细胞的分化；改变组织中 Thl／ThZ细胞因子的比例关 系。结论：伴随疾病进展，MRL ／lp r狼疮小鼠肾组织浸润的 T细 胞中以W2细胞渐占优势。复方中药能够纠正肾组织中N工八M 细胞比例失衡。一方面作用于免疫器官（脾脏），调节Th细胞分 化成Thl／ThZ细胞的潜在倾向性，同时能够重塑肾组织中的微环 境，调节局部浸润Th细胞的分化。