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目的:牙周病是一种由口腔菌群失调所介导的慢性炎症性疾病,已成为许多全身性疾病,如冠心病、阿尔兹海默病、脊柱关节炎及炎性肠病等的危险因素。一些特定的牙周致病菌,如牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)及其菌体成分在这些疾病的发生发展过程中可能起着重要作用。有研究结果显示,灌饲一次P.gingivalis便能够对肠道微生物群的组成和肠道屏障功能产生显著影响,并导致肠道细菌向肝脏扩散以及内毒素血症的发生,但其诱导肠道及全身炎症的机制尚不明了。本实验采用P.gingivalis灌饲小鼠,观察其诱导肠道及脾脏组织的炎症作用,旨在探究该菌对消化系统的影响及其可能机制,并为牙周病与消化系统疾病之间的内在联系提供依据。方法:将P.gingivalis W83液体增菌计数后用于后续实验。10只C57BL/6小鼠适应一周后随机分为两组,实验组灌饲1?10~9 CFU P.gingivalis(0.2 mL PBS重悬),对照组则灌饲等量无菌PBS。每只小鼠每天称重后灌饲一次,共灌饲6周。6周后处死小鼠,采集盲肠内容物以及结肠及脾脏组织。提取盲肠内容物的细菌DNA,通过对细菌16S核糖体RNA基因进行焦磷酸测序来分析肠道菌群结构变化;行苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,H&E)染色观察小鼠结肠组织学变化,并采用实时荧光定量PCR(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测小鼠结肠中CD3抗原(CD3 antigen,CD3)、蛋白酪氨酸磷酸酶C型受体(protein tyrosine phosphatase receptor type C,B220)、黏附G蛋白偶联受体E1(adhesion G protein-coupled receptor E1,F4/80)、干扰素伽马(interferon-γ,IFN-γ)及干扰素调节因子1(interferon regulatory factor 1,IRF-1)的mRNA水平;摘取脾脏,计算脾指数;采用qRT-PCR检测脾脏组织中白介素12a(interleukin 12a,IL-12a)、白介素18(interleukin 18,IL-18)、白介素21(interleukin 21,IL-21)、IFN-γ及IRF-1的mRNA表达;采用蛋白印迹检测脾脏IFN-γ和IRF-1的蛋白水平以及信号传导及转录激活蛋白1(signal transducer and activator of transcription 1,STAT1)和信号传导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的磷酸化水平。结果:1、灌饲P.gingivalis可改变小鼠肠道菌群结构,实验组中拟杆菌门比例升高,而厚壁菌门比例降低(P<0.05);2、H&E染色显示实验组小鼠结肠黏膜下结缔组织中淋巴滤泡出现增多。并且实验组小鼠结肠中B细胞表面标志物——B220的mRNA表达显著升高(P<0.05);3、实验组小鼠脾脏肿大明显,脾指数较对照组小鼠显著升高(P<0.05);实验组小鼠脾脏中IFN-γ及IRF-1的mRNA及蛋白质表达水平,以及STAT1磷酸化水平显著增高(P<0.05)。结论:P.gingivalis可通过调节肠道菌群,破坏肠道微生物屏障,诱发或加重肠道组织及脾脏炎症,导致机体免疫失衡,从而增加牙周病患者对消化系统乃至其他系统性疾病的易感性;IFN-γ/STAT1通路可能在其中起调控作用。