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目的:1梳理幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）相关性萎缩性胃炎（Chronic atrophic gastritis,CAG）的中西医研究现状。2比较Hp感染与非Hp感染的CAG患者胃黏膜病理状态与Hh-Ptch-Smo-Gli及NOX/NF-κB/STAT1信号通路相关因子表达差异,探究Hp促进CAG“炎癌转化”的生物学机制。3构建Hp相关性萎缩性胃炎大鼠模型,观察连朴饮加味方对模型大鼠胃黏膜、血清相关细胞因子表达的影响,探讨连朴饮加味方调控Hh-Ptch-Smo-Gli及NOX/NF-κB/STAT1信号通路中核心靶标,对Hp相关性萎缩性胃炎发挥治疗作用。方法:1.理论研究:查阅古籍与国内外相关文献资料,梳理萎缩性胃炎因机证治的历史发展脉络,整理Hp相关性CAG的流行病学数据和治疗现状等,总结连朴饮加味方治疗Hp相关性CAG的基础研究。2.临床观察:纳入符合标准的43名CAG患者,分为CAG伴Hp感染组（Hp+CAG组,n=21）、CAG不伴Hp感染组（Hp-CAG组,n=22）,观察两组患者胃黏膜苏木精-伊红（HE）染色组织形态学改变,采用蛋白质免疫印迹（Western blot,WB）检测胃黏膜NOX1、NOX2、NOX4、STAT1、P65、p-P65相对表达量;实时荧光定量PCR（RT-q PCR）技术检测胃黏膜Gli1 m RNA、Gli2 m RNA、Gli3 m RNA、Shh m RNA、Smo m RNA、Ptch m RNA、NOX1 m RNA、NOX2 m RNA、NOX4 m RNA、NF-κB m RNA水平。3.实验研究:60只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为空白组（正常对照）10只、造模组50只。采用多因素复合方法建立Hp相关性萎缩性胃炎大鼠模型,每日自由饮用浓度为120mg·L-1的MNNG溶液,用含0.03g·kg-1雷尼替丁的饲料喂养,进食2天后禁食1天。进食第1天每只予以56℃15%NaCl灌胃,进食第2天予以120mg·L-1MNNG溶液灌胃,禁食当天每只予以40%乙醇灌胃,灌胃量为1ml/100g。连续造模至第6周末,禁食12 h,依次给予抗生素(阿莫西林+甲硝唑混合液2ml·只-1·d-1)和吲哚美辛预灌胃,隔日以50g/L碳酸氢钠溶液2m L/只灌胃,15min后予以幽门螺杆菌悬液灌胃,每只1m L,每天1次,共6次。第8周末造模组开始继续多因素复合造模法直至第16周末,期间12、13、14、15、16周末造模组各随机取处死2只大鼠观察造模是否成功。造模全过程中大鼠死亡9只。第16周造模成功后,29只造模大鼠分为模型组（9只）、维酶素组（10只）、连朴饮加味方组（10只）。维酶素组大鼠给予维酶素灌胃;连朴饮加味方组给予黄连10g、厚朴10g、半夏10g、石菖蒲10g、淡豆豉10g、芦根15g、栀子10g、丹参10g、蒲公英30g、土鳖虫10g灌胃。灌胃剂量按实验大鼠与成人（60kg）用药量换算,以蒸馏水稀释后于4℃冰箱保存备用;模型组以等量生理盐水灌胃,各组每日灌胃1次,连续8周。干预结束后取大鼠胃组织和血清,HE染色观察各组大鼠胃黏膜组织形态;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组大鼠血清白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）、胃蛋白酶原Ⅰ（PepsinogenⅠ,PGⅠ）、胃蛋白酶原Ⅱ（PepsinogenⅡ,PGⅡ）、胃泌素（Gastrin,GAS）;WB检测胃黏膜NOX1、NOX2、NOX4、STAT1、P65、p-P65相对表达量;RT-q PCR技术检测胃黏膜Gli1 m RNA、Gli2 m RNA、Gli3 m RNA、Shh m RNA、Smo m RNA、Ptch m RNA、NOX1 m RNA、NOX2 m RNA、NOX4 m RNA、NF-κB m RNA水平。结果:1理论研究结果1.1脾胃虚弱是慢性萎缩性胃炎发病的内因,感染Hp及饮食失节是外因,气机升降失调是其基本病机,病性多属本虚标实,病程中气滞、湿热、血瘀兼见,湿热致瘀是胃黏膜病变发展过程中的关键病机。1.2 Hp凭借Cag A和Vac A等毒力因子,以不同的细胞蛋白质为靶点,干扰宿主细胞内信号通路,加剧胃黏膜炎症、萎缩及肠化程度。不良的饮食及生活习惯,如吸烟及饮酒均增加CAG肠化生及癌变风险,Hp感染与高盐饮食及N-亚硝基化合物的摄入在CAG“炎癌转化”中具有协同作用。2.临床观察结果两组患者胃组织HE染色病例结果:Hp+CAG组患者胃黏膜上皮细胞部分坏死脱落,表面欠光整,腺体数量减少,排列紊乱,可见肠上皮化生,固有层内可见弥漫性淋巴细胞、中性粒细胞浸润;Hp-CAG组患者胃黏膜腺体数量减少,排列稍紊乱,局部可见少量肠上皮化生,固有层内可见淋巴细胞和中性粒细胞浸润,程度较Hp+CAG组轻。RT-q PCR检测结果:与Hp-CAG组相比,Hp+CAG组患者胃黏膜Gli1 m RNA、Shh m RNA、Smo m RNA、Ptch m RNA水平显著降低（P＜0.01）;Gli2 m RNA、Gli3 m RNA、NOX1 m RNA、NOX2 m RNA、NOX4 m RNA、NF-κB m RNA水平显著增高（P＜0.01）。WB检测结果:与Hp-CAG组相比,Hp+CAG组患者胃黏膜NOX1/GAPDH、NOX2/GAPDH、NOX4/GAPDH、p-P65/GAPDH相对表达量明显增高（P＜0.01）,STAT1水平显著降低（P＜0.01）,两组P65/GAPDH相对表达量的差异没有统计学意义（P＞0.05）。3.实验研究结果一般情况:空白组进食量与毛色等均正常;模型组大鼠进食量减少,大便湿粘或稀溏且味臭,毛色干枯无光,反应迟钝、精神萎靡;连朴饮加味方和维酶素干预组:大鼠精神状态较好,毛色光泽,进食量较模型组稍多。与维酶素组相比,连朴饮加味方组大鼠大便较正常,便溏少见。胃组织HE染色结果:空白组大鼠胃组织结构正常,肌层、粘膜、粘膜下层结构清晰,腺体排列密集规整,无肠化生及炎症细胞浸润;模型组大鼠胃组织结构重度异常,上皮细胞坏死脱落,腺体排列极度紊乱,出现大量异型增生,部分可见癌灶,存在明显肠上皮化生及炎症细胞浸润;维酶素组大鼠胃组织结构轻度异常,上皮细胞坏死脱落,腺体排列紊乱,可见少量异型增生及癌灶,存在肠化生并有炎症细胞浸润;连朴饮加味方干预后大鼠胃组织结构接近正常,少量上皮细胞紊乱脱落,腺体排列较为整齐,部分存在轻度萎缩、少量肠上皮化生及炎细胞浸润,未见异型增生及癌灶。血清ELISA结果:与空白组相比,模型组、维酶素组、连朴饮加味方组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α明显增高（P＜0.05）,PGⅠ、PGⅡ、GAS明显降低（P＜0.05）;与模型组相比,维酶素组、连朴饮加味方组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低,PGⅠ、PGⅡ、GAS明显升高（P＜0.05）;模型组大鼠PGR（PGⅠ/PGⅡ）显著低于空白组（P＜0.05）,与模型组相比连朴饮加味方组PGR升高（P＜0.05）;与维酶素组相比,连朴饮加味方组大鼠血清中IL-6、TNF-α水平降低（P＜0.01,P＜0.05）,PGⅠ水平增高（P＜0.01）;维酶素组和连朴饮加味方组大鼠血清中IL-1β、PGⅡ、GAS水平及PGR差异没有统计学意义（P＞0.05）。胃组织RT-q PCR结果:空白组相比,模型组、维酶素组和连朴饮加味方组大鼠胃黏膜Gli1 m RNA、Shh m RNA、Smo m RNA、Ptch m RNA水平显著降低（P＜0.01）,Gli2 m RNA、Gli3m RNA、NOX1 m RNA、NOX2 m RNA、NOX4 m RNA、NF-κB m RNA水平显著升高（P＜0.01）;与模型组相比,维酶素组、连朴饮加味方组大鼠胃黏膜Gli1m RNA、Shh m RNA、Smo m RNA、Ptch m RNA水平增高（P＜0.01）,Gli2 m RNA、Gli3 m RNA、NOX1 m RNA、NOX2 m RNA、NOX4 m RNA、NF-κB m RNA水平明显降低（P＜0.01）;与维酶素组相比,连朴饮加味方组大鼠胃黏膜Gli1 m RNA、Shh m RNA、Smo m RNA水平增高（P＜0.05）,Gli2 m RNA、Gli3 m RNA、NOX1m RNA、NOX2 m RNA、NOX4 m RNA、NF-κB m RNA水平降低（P＜0.01）;维酶素组与连朴饮加味方组大鼠胃黏膜Ptch m RNA水平差异没有统计学意义（P＞0.05）。WB结果:与空白组相比,模型组、维酶素组、连朴饮加味方组大鼠胃黏膜NOX1/GAPDH、NOX2/GAPDH、NOX4/GAPDH、p-P65/GAPDH相对表达量明显增高（P＜0.01）,STAT1/GAPDH相对表达量明显降低（P＜0.01）;与模型组相比,维酶素组、连朴饮加味方组大鼠胃黏膜NOX1/GAPDH、NOX2/GAPDH、NOX4/GAPDH、p-P65/GAPDH相对表达量明显降低（P＜0.01）,STAT1/GAPDH相对表达量明升高（P＜0.05,P＜0.01）;与维酶素组相比,连朴饮加味方组大鼠胃黏膜NOX1/GAPDH、NOX2/GAPDH、NOX4/GAPDH、p-P65/GAPDH相对表达量明显降低（P＜0.01）,STAT1/GAPDH相对表达量明显升高（P＜0.01）;各组P65/GAPDH相对表达量差异没有统计学意义（P＞0.05）。结论:1.Hp相关性CAG以脾胃湿热证多见,随病程进展胃黏膜病变逐渐加重,多兼瘀血证,连朴饮加味方可分解湿热,调畅气机,化瘀通络,契合Hp相关性CAG炎癌转化阶段湿瘀互结的核心病机。根除Hp、低盐饮食、适当摄入新鲜果蔬、少食辛辣腌制食品、戒烟限酒及中医辨证治疗有益于延缓Hp相关性CAG胃黏膜病变的进展。2.Hp感染后可能通过抑制Hh-Ptch-Smo-Gli信号通路,并使NOX/NF-κB/STAT1信号通路异常活化,导致胃黏膜长期炎症,促进萎缩及肠上皮化生,增加癌变风险。3.连朴饮加味方通过降低Hp相关性萎缩性胃炎模型大鼠血清中炎症细胞因子水平,升高血清GAS、PGⅠ、PGⅡ水平,在一定程度上恢复PGR,重新活化Hh-Ptch-Smo-Gli信号通路,调整NOX/NF-κB/STAT1通路,显著改善模型大鼠胃组织形态,发挥治疗Hp相关性萎缩性胃炎,预防或截断“炎癌转化”的作用。