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水体富营养化日益严重,导致蓝藻水华不断爆发,其产生的次级代谢产物严重危害人体健康。本论文在野外监测的基础上选用蓝藻水华优势藻种铜绿微囊藻为研究对象,研究了不同磷源对微囊藻生长和产毒的影响,并应用分子生物学的方法初步探索了藻毒素产生机理。
调查了2010年6月至9月份洋河水库的水质数据,藻类种类,细胞内和水中可溶性藻毒素RR和LR的含量及分布特征。洋河水库处于富营养化状态(TN>0.2 mg/L,TP>0.025 mg/L),藻类主要为蓝藻种属,微囊藻为蓝藻中的优势藻种。发现水质中总氮,总磷与藻细胞的生长可能相关。各采样点水样均能检测出藻毒素LR和藻毒素RR,浓度大部分小于1μg/L。
选用磷酸氢二钾、焦磷酸钠、三聚磷酸钠、β-甘油磷酸钠、卵磷脂为磷源,在无磷化BG11培养基中添加相同的浓度磷源,通过检测培养过程中总磷、可溶性磷酸盐、碱性磷酸酶活性、pH值以及藻毒素的含量,研究了不同形态磷对铜绿微囊藻生长和产毒的影响。发现无机磷中磷酸氢二钾,有机磷中的卵磷脂有利于藻类的生长。藻细胞生长所需要磷的浓度比较低,即使在无磷的条件下,也能维持一定时间的生长。碱性磷酸酶能够水解有机磷使水中无机磷浓度增加,藻类主要以无机磷的形式进行生长。有利于藻生长的磷源和促进藻毒素生成的磷源有所不同。
在不同磷源对铜绿微囊藻生长和产毒影响的基础上,选用磷酸氢二钾和β甘油磷酸钠为磷源,在无磷化BG11培养基的基础上,研究了不同磷浓度(磷浓度与自然水体中相近)对藻生长和产毒的影响。发现不同磷源对铜绿微囊藻生长的最适宜浓度不同,藻细胞通过快速吸收和缓慢吸收两个过程利用外源性磷。藻细胞的生长能够影响藻液的pH值,生物量越多,pH升高。磷酸氢二钾能够促进细胞内毒素LR的产生,β-甘油磷酸钠促进毒素的释放。
在以上研究的基础上,进一步利用洋河水库的水研究了磷酸氢二钾对铜绿微囊藻生长和产毒的影响,并利用分子生物学方法初步探索了藻毒素产生机理。发现在此条件下磷对微囊藻的产生有一适宜浓度,藻毒素LR的合成可能与藻毒素合成酶基因mcyB有一定的关系,藻毒素RR与此关系不明显。