牛CMYA1互作蛋白的筛选及其结构域初步鉴定的研究

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肌肉的生长发育是一个高度有序且复杂的生物过程,需要大量基因参与表达及调控。目前,牛肌肉生长发育的分子机制和调控机理尚未研究清楚。通过研究肌肉相关基因的分子功能和结构对揭示肌肉发育的调控机制具有重要意义。CMYA1(原发性心肌症相关蛋白1)基因是肌肉生长发育相关的基因,对肌肉发育及修复起重要作用。牛CMYA1蛋白的N-端是由若干个Xin Repeat组成的一段结构域,长度约占CMYA1蛋白全长的1/2。为筛选牛CMYA1及其Xin Repeat区的互作蛋白,并初步确定出CMYA1的Xin Repeat区蛋白结合的结构域,建立了西门塔尔牛的前腿骨骼肌cDNA文库,构建了用于酵母双杂交系统的CMYA1及其Xin Repeat区的诱饵质粒,分别通过用CMYA1诱饵载体和Xin Repeat诱饵载体对文库进行互作蛋白筛选和互作蛋白验证,共获得了54个互作蛋白和13个基因的3’UTR。通过对CMYA1的Xin Repeat区进行分段对结构域进行初步鉴定,发现了4个Xin Repeat是RPL35A、EIF3G蛋白的最小结合结构域。本研究为CMYA1基因在肌肉发育方面的作用提供分子理论依据,为牛的分子育种和提高肉质产量等方面奠定了理论基础。
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