目的本课题首先研究RA患者中YY1与IL-8的关系,进一步构建动物模型,从体内体外探讨RA患者中YY1调节IL-8表达参与RA发病的机制,为靶向YY1治疗RA提供实验依据。方法1.采用Real-time PCR、Western blot和ELISA等方法检测YY1和IL-8的表达水平;2.以LV-YY1-shRNA和LV-NC慢病毒感染RA患者的PBMC,通过基因芯片分析信号通路的改变;3.Western blot检测LV-YY1-shRNA处理后RA患者PBMC中PI3K和Akt蛋白磷酸化;4.Transwell实验检测LV-YY1-shRNA慢病毒处理后对中性粒细胞迁移能力的影响;5.构建CIA小鼠模型,尾静脉注射LV-YY1-shRNA和LV-NC慢病毒,检测CIA小鼠的炎症水平、中性粒细胞浸润情况和细胞因子表达水平。结果1.RA患者中,YY1和IL-8的mRNA表达水平均升高,且两者呈正相关,干扰YY1表达后可抑制IL-8的产生;2.分别以PI3K、Akt和mTOR的信号通路抑制剂LY294002、BAY 11-7082和Rapamycin处理后,IL-8mRNA的表达明显下降;3.YY1干扰的PBMC中,PI3K和Akt蛋白的磷酸化水平明显下降,表明YY1可通过PI3K-Akt-mTOR信号通路促进IL-8产生;4.以RA患者的PBMC与中性粒细胞共培养,干扰YY1后可抑制中性粒细胞的迁移。5.在CIA小鼠中,注射YY1干扰慢病毒,关节炎症减轻,中性粒细胞浸润减少,IL-8产生减少,同时IFN-γ、IL-6、IL-17A和IL-21等细胞因子的表达水平均明显下降。结论在RA患者中,YY1通过PI3K-Akt-mTOR信号通路诱导IL-8的产生,从而促进中性粒细胞浸润,导致病程加剧,为YY1做为RA治疗新靶点提供了实验基础。