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我国葡萄（Vitis vinifera）主栽品种抗冻性弱，根系的抗寒能力差，冬季需要埋土越冬；因此通过遗传转化将植物抗冻基因导入葡萄中，培育转基因葡萄新品系，对改良葡萄抗寒能力具有重要意义。本研究通过PCR方法成功克隆了胡萝卜抗冻蛋白AFP基因并对其进行序列分析，构建了胡萝卜AFP基因的植物表达载体pBI-AFP，以宝石无核（Ruby Seedless)为受体材料进行了遗传转化。主要结果如下：1以胡萝卜植物组织基因组DNA为模板，通过PCR方法，获得了胡萝卜抗冻蛋白AFP基因，并连接到pGEM-T easy载体中。2通过ProtParam软件和蛋白分析软件Predictprotein对AFP抗冻基因生物信息学的分析，预测该蛋白的分子式为C1709H2680N448O502S16，相对分子质量为38.048kDa，等电点为5.43，该蛋白为亲水性分泌型蛋白，有信号肽存在；其蛋白质二级结构以α-螺旋、β-折叠和无规卷曲为主。3pGEM-AFP和pBI-121经Sac I和Xba I双酶切后连接，转化到大肠杆菌E.coilDH5α感受态细胞，成功构建了植物表达载体pBI-AFP。4通过液氮冻融法将植物表达载体pBI-AFP导入根癌农杆菌EHA105菌株中，经抗生素抗性筛选和PCR鉴定重组质粒成功导入农杆菌，构建了工程菌pBI-AFP/At.EHA105。5获得了适宜宝石无核葡萄叶片诱导不定芽的适宜培养基： CH+2-iP4mg/L+6-BA2mg/L+TDZ4mg/L，不定芽的诱导率为53.3%；获得了适宜超级无核葡萄叶片不定芽分化的培养基：CH+2-iP1mg/L+6-BA1mg/L+TDZ0.5mg/L+CPPU0.5mg/L+ZT1mg/L，不定芽诱导率为46.7%。6采用根癌农杆菌介导的叶盘转化法转化宝石无核葡萄，通过抗性筛选获得了转化葡萄植株，经PCR检测，初步证明目的基因AFP已导入葡萄植株中。