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背景:根据传统观念,肿瘤的治疗方法有三种:手术,化疗和放疗。然而,这些方法在其应用上均存在自身局限性。中医是最古老的治疗系统之一,其中,黄芪(Astragalus membranaceus,AMs)是常见的中药成分,是中医药(Traditional Chinese Medicine,TCM)的重要组成部分。一些临床案例已证实黄芪对治疗癌症有效。但是,我们尚不清楚黄芪抗肿瘤的机制,而且其抗肿瘤的作用也受到很多西医学者的质疑,因此限制了其广泛应用。迄今为止,树突状细胞(dendritic cells,DCs)是机体内唯一被发现的专职性抗原递呈细胞(antigen presenting cells,APC)也是启动机体参与免疫应答的最重要的细胞。近年来,随着广大学者对DCs参与机体肿瘤免疫、抗感染免疫、移植免疫的机制等方面的生物学特性研究的不断深入,DCs日益受到临床医生的重视。本研究的主要通过研究黄芪多糖对树突状细胞细胞的作用进而探讨其在胃癌治疗中的作用机制。目的:研究APS对肿瘤增殖的作用及其机制材料和方法:我们主要从以下三方面进行研究:黄芪多糖对树突状细胞DCs的影响、对体外肿瘤细胞生长的抑制及体内动物实验的研究。首先,我们从小鼠后肢骨髓中分离小鼠树突状细胞(DCs),依据Inaba(Inaba K,1992)创建的方法使用白细胞介素-4(IL-4)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)进行培养。然后,我们探讨与APS注射液共培养下DCs的生长率。我们通过SYBR-Green实时定量PCR检测Toll样受体4(TLR4)的表达,通过蛋白质免疫印迹(Western-Blot)检测I-kappa-B-alpha(IκB-α)的表达,IκB-α是核因子NFκB-p65核易的主要调节蛋白。其次,我们选择人胃癌细胞MKN 45作为靶细胞,与DCs、从小鼠脾脏分离的T细胞和AMs注射液共培养,用MTT法来评估胃癌细胞的数量变化,同时通过免疫荧光方法分析抗活化的caspase 3多克隆抗体和抗PARP p85片段抗体的表达,它们是细胞凋亡的标记。最后,我们进行了体外动物实验研究。通过腋下注射人胃癌细胞MKN45建立裸鼠移植肿瘤模型,并随机分为对照组、细胞因子组、黄芪多糖低浓度组、黄芪多糖高浓度组,每组均8只。黄芪多糖低高浓度对照组分别按10mg/kg、30mg/kg尾静脉注射,对照组静脉注射生理盐水,连续注射15天。试验过程中,每隔2天测量种植瘤体积;试验结束时,处死裸鼠、切除肿瘤,测量瘤体体积及重量,IHC法对KI-67蛋白表达检测同时TUNEL法检测原位肿瘤细胞凋亡。研究APS对肿瘤的抑制作用。结果:首先,我们成功地利用IL-4和GM-CSF体外培养了树突状细胞,且作为DCs标志的CD11c阳性细胞率在80%以上。我们通过SYBR-Green实时定量PCR发现APS可通过上调TLR4促进DCs成熟,且Western blot结果显示APS可抑制IκBα表达。第二,MKN45与DCs、T细胞和APS注射液共培养后,MTT检测结果显示,APS可以显著降低细胞的数量,且免疫荧光结果表明APS可诱导胃癌细胞凋亡。最后,体内动物实验研究结果表明:与对照组比较,黄芪多糖组的种植瘤体重量和体积明显减少,抑瘤率和凋亡率明显增加,且Ki67蛋白的表达呈浓度依赖性降低。结论:作为一个很好的中草药成分,APS可有效治疗胃癌,其机制可能通过调节TLR4介导的信号转导,促进DCs的成熟,抑制胃癌细胞增殖。