超声辐照LHRHa靶向微泡联合顺铂诱导卵巢癌细胞株A2780/DDP凋亡及其机制研究

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目的:观察超声辐照靶向微泡联合顺铂对人卵巢癌A2780/DDP细胞株的抑制增殖和诱导凋亡作用。方法:MTT法分别检测A2780细胞及A2780/DDP细胞经不同浓度顺铂处理24小时后细胞生长活力,通过SPSS软件分别分析其IC50值,将两者IC50值对比得到A2780/DDP细胞株耐药指数。通过MTT比色法检测超声辐照靶向脂质微泡联合顺铂卵巢癌A2780/DDP细胞的增殖能力的改变;流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期改变;采用激光共聚焦显微镜技术检测胞内bax/bcl-2蛋白表达,透射电镜观察细胞形态改变。结果:人卵巢癌A2780/DDP细胞株耐药指数为2.45,超声辐照靶向脂质微泡联合顺铂组细胞增殖抑制率为(44.21±3.05)%,经流式细胞仪测凋亡率为(26.25±1.85)%,均明显高于其他组(P<0.05)。与其他实验组和空白组相比,该组S期细胞与G2期细胞比例明显上调(P<0.05),Bax/bcl-2比例上调明显(p<0.05)。结论:超声辐照靶向脂质微泡联合顺铂不仅能抑制卵巢癌A2780/DDP细胞增殖,还有诱导其凋亡的作用。第二部分超声辐照LHRHa靶向脂质微泡联合顺铂诱导卵巢癌A2780/DDP细胞株凋亡机制研究目的:探讨超声联合LHRHa靶向脂质微泡诱导卵巢癌细胞凋亡的机制。方法:采用超声加微泡处理A2780/DDP细胞,检测其处理后即时、12小时、24小时、48小时后对PI染料的通透性。取对数期生长的A2780/DDP细胞,分为空白组,DDP组,DDP+超声组,DDP+超声+普通脂质微泡以及DDP+超声+ LHRHa靶向脂质微泡组,给与不同的干预手段,分别于作用后12小时、24小时、48小时撤药,采用HPLC法测定细胞中DDP的浓度,流式细胞仪检脂质微泡加超声处理后的不同时间点(即时、12小时、24小时、48小时)细胞膜对PI染料的通透性。结果:超声联合脂质微泡可增加细胞膜对PI染料的通透性,这种作用在处理后即刻最明显,随着时间的延长,细胞膜对PI染料的通透性下降。在所建立的色谱条件下,测得DDP浓度呈良好线性关系,相关系数为R = 0.9994。经HPLC测定DDP在各组细胞中的浓度显示:DDP+超声+ LHRHa靶向脂质微泡组在处理后12小时、24小时胞内药物浓度明显高于其他组。结论:超声联合LHRHa靶向脂质微泡能明显增加卵巢癌A2780/DDP细胞膜通透性,导致细胞内化疗药物DDP浓度增加,从而增强DDP诱导的细胞凋亡。
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