【摘 要】
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枣树在中国有着悠久的栽培历史,河南又是最早栽培枣树的地区之一.为了选育优质丰产的枣树品种,新郑枣树科学研究所筛选了5株枣树优良单株,为了探索早期鉴定优良单株的方法,本
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枣树在中国有着悠久的栽培历史,河南又是最早栽培枣树的地区之一.为了选育优质丰产的枣树品种,新郑枣树科学研究所筛选了5株枣树优良单株,为了探索早期鉴定优良单株的方法,本论文选用一种简便、快速、可靠的分子标记--ISSR技术,探讨其在优良单株早期鉴定方面的应用.其结果如下:1、改良了枣树叶片DNA的提取方法,提取出高质量的枣树基因组DNA,适用于ISSR扩增.2、对枣树ISSR反应体系进行了优化,总体积15μl,引物浓度为0.8μmol/L,2×Taq MasterMix 7.5μl , 45ngDNA.扩增反应程序为: 94℃预变性5min ; 94℃变性1min;50℃左右退火(随引物不同变化)1min;72℃延伸2min;72℃延伸10min;40个循环;4℃保存.3、从100条ISSR引物中筛选出15条条带清晰、多态性丰富的引物用于基因组DNA扩增,得到93条条带,其中多态性条带83条,占89.3%.4、对5株优良单株的ISSR数据进行了相似系数和聚类分析,并建立了5个优良单株的树状聚类图,品种之间的相似系数在0.43-0.81之间,以相似系数0.60为界,可以将5株优良单株分为两大类,1-4号为第一类,5号为第二类.5、根据5株优良单株的形态指标,运用最短距离法进行聚类分析,结果发现运用与ISSR的结果并不完全一致,不同之处在于ISSR法将3号和4号先分为一个亚类,1号和2号也分为一个亚类,然后再将它们四种分为一类.但是传统方法是先将1号、2号、3号分为一个亚类,4号分为一个亚类,再将它们分为一类.
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