干姜、高良姜三种提取液与温热药性及散寒止痛功效相关性的研究

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目的:观察干姜、高良姜三种不同提取液(水提液、挥发油、去挥发油水提液)对小鼠疼痛及寒证大鼠形态学与体内多种生化指标的影响,探讨干姜、高良姜三种提取物与温热药性及其散寒止痛功效的相关性。  方法:散寒止痛实验:将小鼠随机分为空白对照组、溶媒对照组、阳性对照组、干姜、高良姜三种提取液高、低剂量组,采用扭体实验和热板实验观察干姜、高良姜三种提取液对小鼠镇痛效应的影响,并探讨干姜、高良姜三种提取液与散寒止痛功效的相关性。  温热药性实验:将大鼠随机分为空白对照组、模型对照Ⅰ组、模型对照Ⅱ组、阳性对照组、干姜、高良姜三种提取液高、低剂量组,用寒凉药复制大鼠寒证模型,灌服干姜、高良姜三种提取液,观察大鼠的排便、毛色、舌色等形态学指标变化;采用酶联免疫法测定尿内17-羟皮质类固醇(17-OHCS)的排出量,荧光分光光度法测定寒证大鼠尿内儿茶酚胺(CAS)类物质的排出量,观察干姜、高良姜三种提取液对寒证大鼠尿内17-OHCS与CAS类物质肾上腺素(A)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)排出量的影响;采用放射免疫法测定寒证大鼠血清中促甲状腺激素(TSH)的含量,酶联免疫法测定寒证大鼠血清中多巴胺-β-羟化酶(DβH)的含量,观察干姜、高良姜三种提取液对寒证大鼠血清中TSH、DβH的影响;采用酶联免疫法测定寒证大鼠脑干中5-HT的含量,荧光分光光度法测定寒证大鼠脑干中NE、DA的含量,观察干姜、高良姜三种提取液对寒证大鼠脑内神经递质的影响;采用放射免疫法测定寒证大鼠大脑皮层中cAMP、cGMP的含量,观察干姜、高良姜三种提取液对寒证大鼠脑内cAMP、cGMP的影响。  结果:散寒止痛实验:⑴小鼠扭体实验:干姜三种提取液;高良姜水提液、去挥发油水提液对醋酸所引起的小鼠扭体反应均有抑制作用(P<0.05或 P<0.01)。⑵小鼠热板实验:干姜、高良姜三种提取液各剂量对热板所引起的疼痛没有显著的抑制作用。  温热药性实验:⑴寒证大鼠形态学指标变化:干姜、高良姜三种提取液各剂量对寒证大鼠的形态学指标均有不同程度的改善作用。⑵体内生化指标变化:①17-OHCS排出量:干姜挥发油高、低剂量,水提液高、低剂量;高良姜挥发油高、低剂量,去挥发油水提液高、低剂量能增加寒证大鼠尿液中17-OHCS的排出量(P<0.05或P<0.01)。②CAS类物质排出量:干姜挥发油高剂量,水提液高、低剂量;高良姜水提液高剂量,去挥发油水提液高、低剂量均能增加 A的排出量(P<0.05或 P<0.01)。干姜挥发油高、低剂量,水提液高、低剂量;高良姜水提液高、低剂量,去挥发油水提液高、低剂量均能增加NE的排出量(P<0.05或P<0.01)。干姜挥发油高,水提液高;高良姜水提液高剂量均能增加DA的排出量(P<0.05或P<0.01)。③对血清中TSH的影响:干姜水提液高、低剂量,挥发油高剂量,去挥发油水提液高、低剂量;高良姜三种提取液各剂量都可以增加寒证大鼠血清中 TSH的含量(P<0.05或 P<0.01)。④对血清中DβH的影响:干姜水提液高剂量、挥发油高、低剂量、去挥发油高剂量;高良姜三种提取液各种剂量均能增加寒证大鼠血清中DβH的含量(P<0.05或P<0.01)。⑤对脑内神经递质的影响:干姜三种提取液高、低剂量,高良姜水提液高剂量、挥发油高剂量、去挥发油水提液高、低剂量均能增加寒证大鼠脑干内NE的含量(P<0.05或P<0.01)。干姜水提液高剂量、去挥发油水提液高剂量,高良姜去挥发油水提液高剂量能增加寒证大鼠脑干内DA的含量(P<0.05或P<0.01)。干姜水提液高、低剂量、挥发油高剂量、去挥发油水提液高、低剂量,高良姜水提液高、低剂量、挥发油高剂量、去挥发油水提液高剂量能降低寒证大鼠脑干内5-HT的含量,抑制寒证大鼠脑干中5-HT的释放。⑥对脑皮层中cAMP、cGMP的影响:干姜水提液高、低剂量、挥发油高剂量、去挥发油水提液高剂量,高良姜水提液高剂量、挥发油高剂量、去挥发油水提液高、低剂量通过增加寒证大鼠脑皮层中 cAMP的含量(P<0.05或P<0.01)、从而增加寒证大鼠大脑皮层中cAMP/cGMP的比值(P<0.05或P<0.01)。干姜、高良姜三种提取液对cGMP没有显著影响。  结论:干姜、高良姜三种提取液对醋酸所引起的疼痛有一定的抑制作用,而对热板所引起的疼痛没有抑制作用。干姜、高良姜三种提取液均具有不同强度的散寒止痛的功效,其中以水提液的散寒止痛作用最强。干姜、高良姜三种提取液均能不同程度地增加寒证大鼠尿中17-OHCS、CAS类物质的排出量;增加血清中 TSH、DβH的含量;促进寒证大鼠脑干中NE、DA的合成,抑制5-HT的释放;促进大脑皮层中cAMP的合成,但对cGMP没有显著的调节作用,通过调节cAMP合成与释放,从而调节大脑皮层中cAMP和cGMP的比例平衡。干姜、高良姜三种提取液与温热药性及其散寒止痛功效存在一定相关性,其中水提液的相关性更密切。提示干姜、高良姜中具有温热药性的有效成分不只一种,其温热药性是干姜、高良姜中所有有效成分综合作用的体现。水提液具有的温热药性最强,挥发油与去挥发油水提液的温热药性较弱。推测中药药性可能因有效成分的分离而拆分。我们认为干姜、高良姜挥发油与去挥发油水提液可能具有干姜、高良姜的部分药性。
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