目的:建立大鼠对比剂肾病(CIN)模型,探讨尼可地尔对大鼠CIN的保护作用及其分子机制,为预防或治疗CIN探寻新的作用靶点。方法:1.对CIN大鼠进行尼可地尔灌胃,探究其对大鼠CIN的影响。健康雄性SD大鼠24只,适应性饲养1周后随机分为四组(n=6):正常对照组(N组),尼可地尔对照组(NIC组),对比剂肾病组(CIN组),尼可地尔干预组(CIN+NIC组)。NIC及CIN+NIC组给予尼可地尔溶液15mg/kg/d灌胃;N及CIN组同时给予每天灌胃等量生理盐水。所有的大鼠连续灌胃7天;在灌胃的第3天,开始缺水处理24小时;灌胃的第4天,在异氟烷气麻下,CIN、CIN+NIC组大鼠分别间隔15min给予吲哚美辛、L-NAME及碘帕醇诱导CIN,N组、NIC组先后给予等量的PBS缓冲液、生理盐水和生理盐水。2.在碘帕醇注射后的24小时、48小时、72小时,检测其24小时的总尿量,并留取1ml尿液用于检测尿NGAL及尿肌酐水平;同时,眼眶静脉丛中抽取的0.5ml血液用于检测肌酐、胱抑素C。最后,在碘帕醇注射72小时后处死大鼠,摘取肾组织。一侧肾脏用组织固定液浸泡数天后用做相关病理染色,如HE染色、免疫组化染色(Caspase-3)和TUNEL染色;另一侧肾脏于超低温冰箱保存备用,用RT-PCR和Western blot法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3的基因及其蛋白的表达。结果:1.一般状况四组大鼠各个时间的体重、尿量无显著差异。2.各种肾功能指标的动态变化四组大鼠之间基础的Scr、Ccr、NGAL和Cys-C无统计学差异。(1)Scr:注射CM的72小时内,CIN组血清肌酐较基础值增加幅度均超过25%达到对比剂肾损伤诊断标准。造模24、48、72小时后,CIN组的血清肌酐值均高于N、NIC及CIN+NIC三组(P均<0.05);另外,CIN组的血清肌酐值在造模48小时时达到高峰,于72小时时有所回落,而其他三组之间的血清肌酐值在任何时间均无统计学差异。(2)Ccr:CIN组的Ccr在造模24小时后显著降低,48小时后降至低谷,72小时后又有所回升;CIN组这三个时间的Ccr均显著低于另外三组(P均<0.05)。(3)NGAL:在造模后的24小时、48小时、72小时,CIN及CIN+NIC组的尿NGAL值呈持续升高。但是值得注意的是CIN+NIC组的尿NGAL值虽然高于N及NIC两组(P均<0.05),但是却低于CIN组(P<0.05)。(4)Cys-C:在造模后的24小时、48小时CIN及CIN+NIC组的血Cys-C值迅速升高,造模后72小时血Cys-C值升高速度变缓。三个时间CIN+NIC组的CysC值虽然高于N及NIC两组(P均<0.05),但是却显著低于CIN组(P<0.05)。3.HE染色结果CIN组较N组、NIC组和CIN+NIC组肾小管损伤评分显著升高(P均<0.05),与CIN组相比,CIN+NIC组肾小管组织结构的病理损害明显改善(P<0.05)。4.TUNEL染色结果尼可地尔可显著改善对比剂诱导的大鼠肾脏细胞凋亡情况。CIN组凋亡指数不仅较N组及NIC组显著升高(P均<0.05),而且亦显著高于CIN+NIC组(P<0.05)。5.RT-PCR结果Bax mRNA、Caspase-3 mRNA在CIN组的表达水平较N组、NIC组及CIN+NIC组显著升高,差异有统计学意义(P均<0.05);与此同时,Bcl-2 mRNA在CIN+NIC组的表达水平高于CIN组(P<0.05)。6.IHC染色结果虽然CIN组及CIN+NIC组的Caspase-3的表达量均高于N组及NIC组(P均<0.05),但是给予尼可地尔干预后,CIN+NIC组Caspase-3的表达量显著低于CIN组(P<0.05)。7.Western blot结果CIN+NIC组的Bax表达水平较N组及NIC组增加(P均<0.05),但是较CIN组的Bax表达水平有所降低(P<0.05)。另外,CIN组的Bcl-2表达水平显著低于N组、NIC组及CIN+NIC组(P均<0.05)。结论:1.本实验诱导大鼠CIN模型的方法具有快速性和简便性。2.尿NGAL及血Cys-C可协助Scr对CIN进行早期诊断。3.CIN大鼠肾脏中Bax、Caspase-3表达上调,Bcl-2表达下调,且肾小管结构出现破坏,肾小管细胞出现明显的凋亡。4.尼可地尔干预后在一定程度上逆转了CIN大鼠肾脏中上调的Bax、Caspase-3和下调的Bcl-2,减轻了CIN大鼠肾小管上皮细胞的损伤及凋亡。