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肾癌是最常见的10种癌症之一,占所有新发癌症病例的3.7%。世界范围内肾癌发病率持续上升,预后不佳。肾透明细胞癌（cc RCC）是一种以恶性上皮细胞为特征的肾皮质肿瘤,占所有肾癌类型的80%。在过去十年中,食品药品监督管理局批准治疗肾癌的药物已经从2种发展到13种,这代表了包括靶向药物和免疫治疗药物在内的7种不同的有效治疗机制。但药物治疗最终会导致患者耐药,因此寻找肾癌发病的潜在分子机制十分重要。泛素化是一种重要的蛋白翻译后修饰方式,参与调控多种生理过程包括细胞周期和细胞凋亡等,在癌症的发生发展过程中发挥着重要的作用。而本课题中所研究的E3泛素连接酶HECTD3是HECT家族中的一员。文章报道,HECTD3在乳腺癌、卵巢癌、食管鳞癌中有促进细胞对化疗药物抵抗的作用。而至今HECTD3在肾细胞癌中还未有相关报道。通过本课题研究,我们发现:敲低/敲除HECTD3抑制肾透明细胞癌细胞的生长、DNA的合成、降低细胞周期蛋白Cyclin D1的表达及稳定性;过表达HECTD3能够促进肾透明细胞癌细胞的生长、DNA的合成、增加细胞周期蛋白Cyclin D1的表达及稳定性;同时过表达Cyclin D1能够部分回复敲低HECTD3造成细胞生长的抑制;通过内外源IP实验证实:HECTD3能够与Cyclin D1相互作用并且截短体IP实验说明HECTD3主要通过N端DOC结构域与Cyclin D1的C端相互作用;体内泛素化证实HECTD3能够泛素化修饰Cyclin D1且在总体泛素化一致的情况下HECTD3的823位点半胱氨酸酶活突变体对Cyclin D1的泛素化水平受到抑制;HECTD3在肾细胞组织中表达呈阳性,在肾透明细胞癌细胞系中呈普遍高表达的状态;然而,与之前发现不同的是在肾细胞透明癌中HECTD3不影响其对化疗药物的敏感性。这说明在肾透明细胞癌中HECTD3通过泛素化稳定Cyclin D1促进细胞的生长以及DNA的合成以发挥促肿瘤的作用。尽管在肾细胞癌患者的临床上治疗方面已经取得了一定的进展,但疗效并不令人满意。本研究首次发现了细胞周期蛋白Cyclin D1是HECTD3新的底物,并阐明了HECTD3发挥促肿瘤作用的潜在分子机制。这不仅增加了我们对HECTD3以及Cyclin D1发挥癌基因作用的理解,还为E3泛素连接酶HECTD3成为肿瘤治疗靶点提供理论依据。